Question

（1）科学家用植物组织培养的方法，已经把许多植物的离体组织或细胞，培养成完整植物体．请简述利用胡萝卜根，将其培养成正常植株的方法步骤．

 

（2）酵母菌与人们的日常生活密切相关，也是现代生物技术研究常用的模式生物，生物兴趣小组对此进行了下列研究．请你根据他们的研究内容回答问题：
①固定酵母细胞时要将干酵母放入

 

中活化；并将溶化好的海藻酸钠溶液要冷却至室温，其中冷却的原因是

 

．
②在葡萄酒的自然发酵过程中，酵母菌的来源是

 

．
③土壤是酵母菌的大本营，若从含有酵母菌、醋酸菌、青霉菌、毛霉等的土壤中分离到较纯的酵母菌，最简便的方案是在

 

条件下选择培养．若要进一步对酵母菌进行分离与纯化，除稀释涂布平板法外，还有

 

．
④酵母菌的计数通常用血球计数板进行，血球计数板每个大方格容积为0.1mm³，由400个小方格组成．现对某一样液进行检测，如果一个小方格内酵母菌过多，难以计数，应先

 

后再计数．若多次重复计数后，算得每个小方格中平均有5个酵母菌，则10mL该培养液中酵母菌总数有

 

个．

Answer 1

考点：制备和应用固相化酶,探究培养液中酵母种群数量的动态变化,酒酵母制酒及乙酸菌由酒制醋

专题：

分析：1、酵母菌在有氧和无氧的条件下都能生活：在有氧时，酵母菌大量繁殖，但是不起到发酵效果；在无氧时，繁殖速度减慢，但是此时可以进行发酵．在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁殖，再隔绝氧气进行发酵．20℃左右最适合酵母菌繁殖，酒精发酵的最佳温度是在18℃～25℃，pH最好是弱酸性．
2、固定化技术包括物理吸附法、化学结合法和包埋法，由于细胞体积大，难以吸附或者结合，一般采用包埋法．如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色，则说明海藻酸钠浓度太低，包埋的酵母菌数量太少；如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，则说明海藻酸钠浓度过高．

解答： 解：（1）利用胡萝卜根培养成正常植株的方法步骤：制备（固体）培养基、切取（有形成层的）胡萝卜根并消毒（外植体消毒）、接种、培养、移栽和栽培．①固定酵母（2）①细胞时要将干酵母放入蒸馏水中活化，使其恢复活跃的状态；并将溶化好的海藻酸钠溶液要冷却至室温，其中冷却的原因是防止高温杀死酵母菌．
②因葡萄皮上附着有野生型酵母菌，故在葡萄酒的自然发酵过程中，酵母菌的来源是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌．
③若从含有酵母菌、醋酸菌、青霉菌、毛霉等的土壤中分离到较纯的酵母菌，由于酵母菌、醋酸菌、青霉菌、毛霉均属于需氧型，故最简便的方案是在无氧条件下选择培养．若要进一步对酵母菌进行分离与纯化，除稀释涂布平板法外，还有平板划线法．
④通常用血球计数板对培养液中酵母菌进行计数，计数时应先稀释后再计数．若多次重复计数后，算得每个小方格中平均有5个酵母菌，则10mL该培养液中酵母菌总数有=5×400÷（0.1×10-³）×10=2×10⁸个．
故答案为：
（1）制备（固体）培养基、切取（有形成层的）胡萝卜根并消毒、接种、培养、移栽和栽培
（2）①蒸馏水    防止高温杀死酵母菌
②附着在葡萄皮上的野生型酵母菌
③无氧   平板划线法
④稀释   2×10⁸

点评：本题以酵母菌为素材，考查果酒和果醋制备、微生物的实验室培养、酵母细胞的固定化等相关知识，意在考查学生的识记和理解能力，属于中档题．