Question

19．微生物与人类关系密切．下表为培养某种微生物的培养基配方，请回答有关问题：

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4•7H2O	硝酸铵	琼脂
1.4g	2.1g	0.2g	1.0g	15.0g

（1）从此培养基的配方来看，最适合培养的微生物是B．
A．酵母菌           B．硝化细菌          C．纤维素分解菌            D．大肠杆菌
（2）培养微生物的培养基可以分为液体培养基和固体培养基，两种培养基的配方中一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求．
（3）稀释涂布平板法是微生物接种常用的方法之一，该法是将菌液进行一系列梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布在琼脂固体培养基的表面，进行培养．稀释条件足够时，可形成由单个细胞形成的单个菌落，因此可用于微生物纯化培养．
（4）如果要进行土壤中分解尿素的细菌的分离，培养基中必须含有的成分是尿素，验证分解尿素的
细菌是否存在，常用的方法是培养基中加入酚红指示剂，若变红则说明存在分解尿素的细菌．
（5）微生物接种的方法很多，在用平板划线法操作结束时，为什么仍需要灼烧接种环？杀死接种环上的细菌，避免对环境造成污染．
（6）假设培养结束后，发现培养基上菌落连成一片，可能的原因是什么？（列举两项）稀释倍数不够，菌液的浓度太高；划线时，两次划线之间没有灼烧接种环；培养过程中灭菌不严格，受到了其他微生物的污染．

Answer 1

分析 微生物的营养物质主要包括体液、氮源、水和二氧化碳等．分离和纯化微生物的接种方法主要有稀释涂布平板法和平板划线法．尿素分解菌可以用酚红指示剂进行鉴定．

解答 解：（1）根据题表分析，该培养基配方中有氮源、无机盐等，缺少碳源，所以可以作为自养微生物的培养基．
A、酵母菌属于异养兼性厌氧型微生物，A错误；
B、硝化细菌属于化能自养型微生物，B正确；
C、纤维素分解菌是异养微生物，C错误；
D、大肠杆菌属于异养微生物，D错误．
故选：B．
（2）培养微生物的培养基可以分为液体培养基和固体培养基．培养基中的营养成分主要包括碳源、氮源、水和无机盐等，培养基还需要满足微生物生长对特殊营养物质、酸碱度以及氧气的要求．
（3）稀释涂布平板法需要将菌液进行一系列梯度稀释，然后进行涂布平板培养，可形成由单个细胞形成的单个菌落，所以该方法可以用于微生物的纯化培养．
（4）如果要进行土壤中分解尿素的细菌的分离，培养基中必须含有的成分是尿素，验证分解尿素的
细菌是否存在，常用的方法是培养基中加入酚红指示剂，若变红则说明存在分解尿素的细菌．
（5）常用的微生物接种的方法有平板划线法和稀释涂布平板法；在用平板划线法接种时，第一步划线前，灼烧接种环是防止接种环上有其它微生物而污染培养基，以后每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次接种时留下的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来自上次划线的末端，以便通过多次划线后，得到单个的菌落；划线结束后仍要灼烧接种环，以免菌种对环境造成污染．
（6）假设培养结束后，发现培养基上菌落连成一片，可能的原因是稀释倍数不够，菌液的浓度太高；划线时，两次划线之间没有灼烧接种环；培养过程中灭菌不严格，受到了其他微生物的污染．
故答案为：
（1）B
（2）固体培养基　  碳源　  氮源　  pH　  特殊营养物质
（3）一系列梯度稀释  　菌落
（4）尿素　  培养基中加入酚红指示剂，若变红则说明存在分解尿素的细菌　（5）杀死接种环上的细菌，避免对环境造成污染
（6）稀释倍数不够，菌液的浓度太高；划线时，两次划线之间没有灼烧接种环；培养过程中灭菌不严格，受到了其他微生物的污染

点评 本题主要考查微生物的营养物质及接种和培养，意在强化学生对微生物的培养的相关知识的识记、理解与运用．