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【题目】地下黑作坊用病死猪肉腌制的腊肉往往含有大量的细菌,可利用“荧光素——荧光素酶生物发光法”对市场中腊肉含细菌多少进行检测:

将腊肉研磨后离心处理,取一定量上清液放入分光光度计测定发光强度的仪器反应室内,加入适量的荧光素和荧光素酶,在适宜条件下进行反应;

记录发光强度并计算ATP含量;

测算出细菌数量。分析并回答下列问题。

1荧光素接受________提供的能量后就被激活,在荧光素酶的作用下形成氧化荧光素并且发出荧光。根据发光强度可以计算出生物组织中ATP的含量,原因是发光强度与ATP含量成________正比/反比;根据ATP含量进而测算出细菌数量的依据是:每个细菌细胞中ATP含量________。

2“荧光素——荧光素酶生物发光法”中涉及的能量转换是________;生物细胞中ATP的水解一般与__________吸能反应或放能反应相联系。

3研究人员用不同条件处理荧光素酶后,测定酶浓度与发光强度如图所示。其中高浓度盐溶液经稀释后酶活性可以恢复,高温和Hg2+处理后酶活性不可恢复。若要节省荧光素酶的用量,可以使用________处理;Hg2+处理后酶活性降低可能是因为___________。

【答案】1ATP 正比 大致相同且相对稳定

2化学能→光能 吸能反应

3Mg2+ Hg2+破坏了酶的空间结构

【解析】1荧光素在荧光素酶和ATP等物质的参与下可进行反应发出荧光。ATP是生命活动能量的直接来源,发光强度与ATP的含量成正比,所以根据发光强度可以计算出生物组织中ATP的含量。每个细菌细胞中ATP含量大致相同且相对稳定,故可根据ATP含量进而测算出细菌数量。

2荧光素--荧光素酶生物发光法中涉及的能量转换是化学能转变为光能;放能反应一般与ATP的合成相联系,吸能反应一般与ATP的水解相联系。

3因高浓度盐溶液经稀释后酶活性可以恢复,高温和Hg2+处理后酶活性不可恢复。故要节省荧光素酶的用量,可以使用Mg2+处理;Hg2+处理后酶活性降低可能是因为Hg2+破坏了酶的空间结构使酶变性。

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