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    14．乙草胺是除草剂中常见的化学成分，在土壤和水体中存在时间长，难以降解．请回答下列问题：
    （1）实验小组欲从土壤中获取乙草胺降解菌，需将土壤样品置于以乙草胺为唯一碳源的培养基中进行富集培养．
    （2）该实验小组选取乙草胺浓度为800mg/L的富集液进行系列稀释，分别取103、104和105倍数的稀释液0.1mL涂布于培养基上，每个稀释倍数涂布三个平板，各平板的菌落数分别为（286、298、297），（35、33、31），（36、7、2）．
    ①不适合用于计数的为105倍数的稀释液，用另外两组稀释倍数进行计数得到的细菌数不一致的原因可能是稀释倍数为103时，更多的菌落连在一起最终形成单菌落，导致结果小于稀释倍数为104组．
    ②在稀释倍数为104培养基中，则每毫升富集液中乙草胺降解菌数量是3.3×106．
    ③某同学认为为了防止杂菌的污染，可在培养基中加入青霉素，你觉得该同学的说法是否确？不正确，理由是青霉素抑制杂菌繁殖的同时，也会抑制目的菌的繁殖．
    （3）实验小组从土壤中筛选出两株乙草胺降解菌D1和D2，温度对两株降解菌的生长的影响如图所示．对温度适应范围更广的是菌株D1，温度会影响菌株的生长状况的原因是温度会影响与菌株生长代谢有关酶的活性．

    分析 1、两种纯化细菌的方法的比较

     优点缺点适用范围
    平板划
    线分离法    		可以观察菌落特征，对混合菌进行分离不能计数适用于好氧菌
    稀释涂布
    平板法    		可以计数，可以观察菌落特征吸收量较少，较麻烦，平板不干燥效果不好，容易蔓延适用于厌氧，兼性厌氧
    2、检测土壤中细菌总数，可以看出采用的计数方法是稀释涂布平板法进行计数．用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数时，在每一个梯度浓度内，至少要涂布3个平板，选择菌落数在30～300的进行记数，求其平均值，再通过计算得出土壤中细菌总数．

    解答 解：（1）分析题意可知，实验小组欲从土壤中获取乙草胺降解菌，因此需要利用选择培养基选择培养基该降解菌，即将土壤样品置于以乙草胺为唯一碳源的培养基中进行富集培养．
    （2）该实验小组选取乙草胺浓度为800mg/L的富集液进行系列稀释，分别取103、104和105倍数的稀释液0.1mL涂布于培养基上，每个稀释倍数涂布三个平板，各平板的菌落数分别为（286、298、297），（35、33、31），（36、7、2）．
    ①用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数时，在每一个梯度浓度内，至少要涂布3个平板，选择菌落数在30～300的进行记数，求其平均值，因此105倍数的稀释液不适合用于计数；稀释倍数为103时，更多的菌落连在一起最终形成单菌落，导致结果小于稀释倍数为104组，因此用另外两组稀释倍数进行计数得到的细菌数不一致．
    ②在稀释倍数为104培养基中，则每毫升富集液中乙草胺降解菌数量=（35+33+31）÷3÷0.1×104=3.3×106．
    ③青霉素抑制杂菌繁殖的同时，也会抑制目的菌的繁殖，因此该同学说法错误．
    （3）分析曲线图可以看出，对温度适应范围更广的是菌株 D1，温度会影响菌株的生长状况的原因是温度会影响与菌株生长代谢有关酶的活性．
    故答案为：
    （1）乙草胺
    ①105 稀释倍数为103时，更多的菌落连在一起最终形成单菌落，导致结果小于稀释倍数为104组
    ②3.3×106
    ③不正确    青霉素抑制杂菌繁殖的同时，也会抑制目的菌的繁殖
    （2）D1      温度会影响与菌株生长代谢有关酶的活性

    点评 本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记培养基的成分、种类及功能；识记接种微生物常用的两种方法及注意事项，掌握微生物计数的方法，属于考纲识记和理解层次的考查．

    练习册系列答案
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