Question

16．有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境．研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解．分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示．

（1）微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、氮源与无机盐四类，该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源，其原因是只有能利用苯磺隆的微生物能正常生长和繁殖．
（2）为了获得纯净的培养物，无菌技术非常关键．无菌技术除了防止实验室的培养物被其他微生物污染外，还可以避免操作者自身被微生物污染．
（3）纯化菌株时，通常使用的划线工具是接种环．划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落．造成划线无菌落可能的操作失误有①接种环灼烧后未冷却；②划线未从第一区域末端开始（至少答2点）．
（4）为探究苯磺隆的降解机制，将该菌种的培养液过滤离心，取上清液作图乙所示实验．该实验的假设是目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白质，该实验设计是否合理？为什么？不合理，缺少空白对照．

Answer 1

分析 分析题图：图示是探索苯磺隆降解机制的实验过程，图甲中，首先用选择培养基从土壤中筛选出菌种，再采用平板划线法纯化出相应的菌种；图乙中：通过测定苯磺隆的浓度测定其降解率．据此答题．

解答 解：（1）微生物的各种培养基配方一般都含有水、碳源、氮源和无机盐四类营养．该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源，因为只有能利用苯磺隆的微生物能正常生长和繁殖．
（2）无菌技术除了防止实验室的培养物被其他微生物污染外，还可以避免操作者自身被微生物污染．
（3）纯化菌株时，通常使用的划线工具是接种环．划线接种时，在第一区域划线后须将该工具灼烧灭菌后再划线，在第二次划线时须从第一次划线的末端开始，这样做的目的是将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基上．
（4）从图乙上清液中加入蛋白酶溶液可知是用于水解上清液中的某蛋白质的，由此可判定实验假设是目的菌株通过分泌某种蛋白质来降解苯磺隆，但是尚需设置不加入蛋白酶的对照组实验，否则没有说服力，因而不合理．
故答案为：
（1）无机盐     只有能利用苯磺隆的微生物能正常生长和繁殖
（2）避免操作者自身被微生物污染
（3）接种环    ①接种环灼烧后未冷却；②划线未从第一区域末端开始
（4）目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白质          不合理，缺少空白对照

点评 本题结合探究实验过程，考查微生物的培养和分离、探究实验等知识，要求考生识记培养基的成分、种类及作用；掌握分离微生物常用的两种方法及操作过程；掌握探究实验的原则，能结合图中信息知识答题．