Question

基因工程又叫基因拼接技术．
（1）在该技术中，用人工合成方法获得目的基因的途径之一是：以目的基因转录的

 

为堡板，

 

成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成

 

．
（2）基因工程中常用的受体细胞有细菌、真菌

 

．若将真核基因在原核细胞中表达，对该目的基因的基本要求是

 

．
（3）假设以大肠杆菌质粒作为运载体，并以同一种限制性内切酶切割运载体与且的基因，将切割后的运载体与目的基因片段混合，并加入DNA连接酶．连接产物至少有

 

种环状DNA分子，它们分别是

 

．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术

专题：

分析：基因拼接技术一般要经过四个步骤：一是获取目的基因，二是目的基因与运载体结合，三是将目的基因导入受体细胞，四是目的基因的检测与表达．
获得目的基因的方法：①从基因文库中获取  ②利用PCR技术扩增  ③人工合成（化学合成）．人工合成目的基因有两种方法：一是通过mRNA→单链DNA→双链DNA；二是根据蛋白质氨基酸序列→mRNA序列→推测出结构基因核苷酸序列→通过化学方法人工合成．

解答： 解：（1）目的基因的获取主要有两种途径，一是从供体细胞的DNA中直接分离基因，二是人工合成基因．人工合成的方法之一有反转录法，即以目的基因转录的mRNA为模板，逆转录成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成双链DNA（目的基因）．
（2）由于真核生物基因中有不表达的核苷酸序列（内含子），所以要想真核生物的基因在原核细胞中表达，就必须除去目的基因中的内含子．
（3）由于同种限制酶切割形成的粘性末端相同，因此目的基因和运载体上具有相同的粘性末端．当把切割后的运载体与目的基因放在一起，并加入DNA连接酶，将会出现3种环状的DNA分子，即运载体自连的、目的基因片段自连的、运载体与目的基因片段相连的环状DNA分子．
故答案为：
（1）信使RNA（mRNA）逆转录（反转录）    双链DNA（目的基因）
（2）动植物细胞  除去内含子
（3）3  运载体自连的、目的基因片段自连的、运载体与目的基因片段相连的环状DNA分子

点评：本题考查了基因工程的相关知识，意在考查考生的识记能力和理解能力，并能将所学知识构成一定的知识网络，难度适中．