Question

利用动物乳腺生产产品的技术称为动物乳腺反应器技术。2005年山东省青岛“崂山奶山羊乳腺生物反应器的研制”项目通过鉴定，该项目生产的药用蛋白具有表达效率高、成本低、安全性高、易于分离纯化的优点，可产生乙肝表面抗原及抗凝血酶Ⅲ等医药产品，造福人类健康。下图为利用生物技术获得生物这一新品种和抗虫棉的过程，据图回答：

（1）在基因工程中，A表示         ，如果直接从苏云金杆菌中获得抗虫基因，①过程使用的酶区别于其他酶的特点是                                           。

（2）在研究过程中，研究人员首先从相关基因组中获取了目的基因，并采用      技术对目的基因进行了扩增，然后将目的基因与质粒等载体组合形成了重组载体。在重组载体的构建过程中需要的工具酶有                  、                。

（3）基因工程的四个基本操作步骤是目的基因的获取、                、将目的基因导入受体细胞和                 。若要获得的转基因山羊分泌的乳汁中含有人抗凝血酶Ⅲ，则所构建的基因表达载体必须包括：某种山羊                 及其启动子、终止子、标记基因、            和复制原点等。

（4）将目的基因导入受体细胞的过程中，在③过程中一般是采用          方法，但我国科学家独创了           获得转基因抗虫棉，在②过程中一般采用         方法，受体细胞一般是          。

（5）由于转基因表达产物存在于山羊的乳汁中，检测其体内是否出现药用蛋白，在分子水平上的检测方法及结果是什么?

检测方法是：从转基因山羊的乳汁中提取         ，用                ；

预测结果是：如果出现杂交带，表明                          。

（6）要确定目的的基因（抗虫基因）导入棉花细胞后，是否能稳定遗传并表达，需进行检测和鉴定工作，请写出在个体水平上的鉴定过程：                         。

（7）将目的基因导入受体细胞，需要构建基因表达载体，目的是_____________      。

Answer 1

（1）目的基因  一种限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开（或一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并且在特定的位点上切割DNA分子）

（2）PCR（聚合酶链式反应） 限制酶   DNA连接酶

（3）基因表达载体的构建    目的基因的检测与鉴定   乳腺分泌蛋白基因     人抗凝血酶Ⅲ基因

（4）农杆菌转化法  花粉管通道法   显微注射技术   受精卵

（5）蛋白质   相应的抗体进行抗原—抗体杂交   山羊的乳汁中出现了药用蛋白

（6）让害虫吞食转基因棉花的叶子，观察害虫的存活情况，以确定其是否具有抗虫性状。

（7）使目的基因在受体细胞中稳定存在，并可以遗传给下一代，同时使目的基因能够表达和发挥作用