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    （8分）PCR技术是把- DNA片段在体外酶的作用下，合成许许多多相同片段的一种方法，利用它能快速而特异地扩增任何要求的目的基因或DNA分子片段，它的基本过程如下图所示：

    图中一表示每次扩增过程中需要的引物（加入足够多）。每个引物含20个脱氧核苷酸，并分别与DNA片段两端碱基互补，其作用是引导合成DNA子链，还作为子链的一部分，不会从模板链上脱落下来。
    （1）PCR技术的原理是模拟生物体内的            过程。
    （2）PCR扩增过程中需要对DNA片段进行高温处理，其目的是      ，此过程在生物体内需酶的参与，作用部位是DNA的          键。
    （3）若引物都用3H标记，从理论上计算，所得DNA分子中含有。H标记的占          。
    （4）假定DNA片段含200对碱基，进行3次扩增，从理论上计算需要提供          个游离脱氧核苷酸。

    （8分，每空1分）
    （1）DNA复制
    （2）使DNA的两条链彼此分开（或解旋） 氢
    （3）两 单链DNA   100％ （4）2520

    解析

    练习册系列答案
    年级 高中课程 年级 初中课程
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    科目：高中生物 来源：2007年饶平二中高三级生物科适应性综合测试 题型：022

    PCR技术是把某一DNA片段在体外酶的作用下，合成许许多多相同片段的一种方法，利用它能快速而特异的扩增任何要求的目的或DNA分子片段；电泳技术则是在外电场作用下，利用分子携带的净电荷不同，把待测分子的混合物放在一定的介质（如琼脂糖凝胶）中进行分离和分析的实验技术，利用它可分离氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸等物质和作亲子法学鉴定。下图中A～D是电泳装置及相应电泳结果。

    请回答：

    (1)

    电泳与叶绿体色素分离采用的纸层析法比较，后者使用的介质是________。电泳过程中分子的迁移速率除与本身所带净电荷的多少有关外，你认为还受什么因素影响（至少列出一种）？________。

    (2)

    PCR技术能把某一DNA片段进行扩增，是依据什么原理？________。

    (3)

    图C是把含有21个氨基酸的多肽进行水解，得到的氨基酸混合物进行电泳的结果，故可推知该多肽是由________种氨基酸构成的。

    (4)

    图D通过提取某小孩和其母亲，以及待测定四位男性的DNA，分别由酶处理后，生成含有若干DNA片段，并已进行扩增得到的混合物，然后进行电泳所得到的一组DNA指纹图谱，请分析：谁是该小孩真正生物学上的父亲？为什么？

    (5)

    下面是PCR的反应体系及反应条件，请据此回答：

    ①请指出DNA分子复制所需的条件是：________、________、________和________。

    与细胞核中DNA分子复制相比，95℃条件下变性30s的目的是：________。

    反应体系中的缓冲液相当于细胞中的________。

    ②如果有反应体系中加入模板DNA分子100个，则经过30个循环后，DNA分子的数量将达到________个。

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    PCR技术是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术，如图表示合成过程，请据图分析回答问题。

    (1)A过程高温使DNA变性解旋，对该过程的原理叙述，正确的是(　　)。

    A．该过程用耐高温的解旋酶破坏氢键

    B．该过程用限制酶破坏磷酸二酯键

    C．该过程不需要解旋酶的作用

    D．该过程与人体细胞的过程完全相同

    (2)C过程要用到的酶是________，这种酶在高温下仍保持活性，因此在PCR扩增时可以加入________次，________(需要、不需要)再添加。PCR反应除提供酶外，还需要满足的基本条件有__________________________________________________________________。

    (3)如果把模板DNA的两条链用15N标记，游离的脱氧核苷酸不做标记，控制“95 ℃～55 ℃～72 ℃”温度循环3次，则在形成的子代DNA中含有15N标记的DNA占________。

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    科目：高中生物 来源：2011-2012学年海南省海南中学高二下学期期中考试理科生物试卷（带解析） 题型：综合题

    应用基因工程技术可以获得人们需要的生物新品种或新产品。请根据资料和图解回答下列问题：
    材料一：蜘蛛丝（丝蛋白）被称为“生物钢”，有着超强的抗张强度，可制成防弹背心、降落伞绳等。蜘蛛丝还可被制成人造韧带和人造肌腱。科学家研究出集中生产蜘蛛丝的方法——培育转基因蜘蛛羊。
    材料二：注射疫苗往往会在儿童和部分成年人身上引起痛苦，将疫苗藏身于水果蔬菜中，人们在食用这些转基因植物的同时也获得免疫力，因而无需免疫接种，这一新概念将引起疫苗研究的一场革命。

    （1）过程①⑤所需要的工具酶有                   ，构建的乙肝表面抗原蛋白基因表达载体一般由                                  等部分组成。
    （2）过程②是将重组质粒导入山羊受体细胞，受体细胞应选择          ，采用最多的也是最有效的导入方法是           ；
    过程⑥是将重组质粒导入莴苣受体细胞，受体细胞可为                 ，采用最多的导入方法是                 。
    （3）通过①～④过程培育的蜘蛛羊可以作为乳腺生物反应器，从         中提取所需要的蜘蛛丝蛋白。还可以形成膀胱生物反应器，从         中提取所需蛛丝蛋白，简化提取过程。
    资料三：PCR技术（聚合酶链式反应）是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术，下图表示合成过程，请据图分析回答：

    （4）A过程高温使DNA变性解旋，对该过程的原理叙述正确的是:(    )

    A．该过程用到耐高温的解旋酶破坏氢键；
    B．该过程用到限制酶破坏磷酸二酯键；
    C．该过程不需要解旋酶的作用；
    D．该过程与人体细胞的过程完全相同；
    （5）从图中可知，催化C过程的酶是  　         ，它与正常细胞内的酶区别是 　    ；PCR反应除提供酶、DNA模板、通过控制温度使DNA复制在体外反复进行外，还需要满足的两个基本条件是                        。
    （6）如果把模板DNA的两条链用15N标记，游离的脱氧核苷酸不做标记，控制“94℃-55℃-72℃”温度循环3次，则在形成的子代DNA中含有15N标记的DNA占     。如果模板DNA分子共有a个碱基对，其中含有胞嘧啶m个，则该DNA复制10次，需要加入胸腺嘧啶脱氧核苷酸                  个。

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    科目：高中生物 来源：2013届广东省中山市高二下学期期末考试生物试卷（解析版） 题型：选择题

    下列关于生物工程中常用的几种酶的叙述中，错误的是

    A．纤维素酶、果胶酶可分解细胞壁

    B．用于PCR技术的DNA聚合酶耐高温

    C．一种限制酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列

    D．DNA连接酶可把目的基因与运载体黏性末端的碱基黏合

     

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    科目：高中生物 来源：2010-2011学年高考复习单元检测：选修一生物技术实践专题 题型：综合题

    (2009年惠州模拟)PCR(多聚酶链式反应)技术是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术，下图表示合成过程，请据图分析回答：

    (1)A过程高温使DNA变性解旋，对该过程的原理叙述，正确的是________。

    A．该过程用到耐高温的解旋酶破坏氢键

    B．该过程用到限制酶破坏磷酸二酯键

    C．该过程不需要解旋酶的作用

    D．该过程与人体细胞的过程完全相同

    (2)C过程要用到的酶是________。这种酶在高温下仍保持活性，因此在PCR扩增时可以________加入，________(需要/不需要)再添加。PCR反应除提供酶外，还需要满足的基本条件有：

    ________________________________________________________________________

    ________________________________________________________________________。

    (3)如果把模板DNA的两条链用15N标记，游离的脱氧核苷酸不做标记，控制“94℃—55℃—72℃”温度循环3次，则在形成的子代DNA中含有15N标记的DNA占________。

    (4)如果模板DNA分子共有a个碱基对，其中含有胞嘧啶m个，则该DNA复制10次，需要加入胸腺嘧啶脱氧核苷酸________个。

    (5)PCR中由碱基错配引起的变异属于________。假设对一个DNA进行扩增，第一次循环时某一条模板链上发生碱基错配，则扩增若干次后检测所用DNA的扩增片段，与原DNA相应片段相同的占________。

     

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