Question

10．Bt毒蛋白基因是从苏云金芽孢杆菌中分离出来的抗虫基因，因其表达产物Bt毒蛋白具有杀虫效果好、安全、高效等优点而成为应用最为广泛的基因．请回答下列有关转基因抗虫植物的问题：
（1）要从苏云金芽孢杆菌中获取Bt毒蛋白基因，可根据Bt毒蛋白基因的部分已知序列，设计特异性引物（对），再利用PCR技术扩增出Bt毒蛋白基因．
（2）构建重组质粒时，常用Ti质粒作为载体，是因为Ti质粒上具有T-DNA（可移动的DNA），它能把目的基因整合到受体细胞（植株细胞）的染色体DNA上．这种将基因表达载体导入受体细胞的方法是农杆菌转化法．
（3）要确定抗虫基因导入棉花细胞后，是否赋予了棉花抗虫特性，在个体水平上还需要做抗虫接种实验；若要检测具有抗虫基因的棉花是否产生了相应毒蛋白，在分子水平上可利用抗原-抗体杂交方法进行检测．
（4）目前，转基因植物的安全性问题是社会争论的热点．如有些人认为转基因植物的种植会威胁环境安全；但也有人认为转基因植物的种植减少了农药的使用，有利于减轻污染．面对转基因技术的利弊，我们应持有的正确做法是趋利避害，不能因噎废食．

Answer 1

分析 基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取②基因表达载体的构建③将目的基因导入受体细胞④目的基因的检测与鉴定．
目的基因的检测与鉴定
1．分子水平上的检测  
  ①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术
  ②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术
  ③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术
2．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．
（例：用虫食用棉花，观察其存活情况，来鉴定棉花是否具有抗虫特性．）

解答 解：（1）要从苏云金芽孢杆菌中获取Bt毒蛋白基因，扩增目的基因利用PCR技术，该技术需要引物，可根据Bt毒蛋白基因的部分已知序列，设计特异性引物（对）．
（2）构建重组质粒时，常用Ti质粒作为载体，是因为Ti质粒上具有T-DNA（可移动的DNA），它能把目的基因整合到受体细胞（植株细胞）的染色体DNA上．这种将基因表达载体导入受体细胞的方法是农杆菌转化法．
（3）要确定抗虫基因导入棉花细胞后，是否赋予了棉花抗虫特性，在个体水平上还需要做抗虫接种实验；若要检测具有抗虫基因的棉花是否产生了相应毒蛋白，在分子水平上可利用抗原-抗体杂交方法进行检测．
（4）如有些人认为转基因植物的种植会威胁环境安全；但也有人认为转基因植物的种植减少了农药的使用，有利于减轻污染．面对转基因技术的利弊，我们应持有的正确做法是趋利避害，不能因噎废食．
故答案为：
（1）引物（对）   PCR
（2）T-DNA（可移动的DNA）　  染色体DNA     农杆菌转化法
（3）抗虫接种　   抗原-抗体杂交
（4）农药     趋利避害，不能因噎废食

点评 本题考查了基因工程的有关知识，要求考生能够识记基因工程的操作步骤；区分识记目的基因导入受体细胞的不同方法；掌握目的基因检测与鉴定的方法；明确抗虫植物研究的生态学意义．