赖氨酸是人体必需氨基酸之一，可促进人体发育、增强免疫力。乙图为赖氨酸转基因克隆牛的培育流程，其中字母表示相应的操作过程。请回答：
(1)构建基因表达载体的过程如甲图所示，其中Pst I、Sma I、EcoR I、Apa I为四种限制酶，该过程中所使用的限制酶是_________和_________，除限制酶外，该过程还需要的工具酶有_________。基因表达载体除图示结构外，还应含有__________和终止子等结构。
(2)为了获得较多的卵母细胞需要对供体注射______________，卵母细胞要培养至 时期，才具备受精能力。
(3)胚胎成纤维细胞在培养过程中会出现_____________和____________现象，分瓶时需用______处理以得到细胞悬液，进而进行__________培养使细胞增殖。
(4)图乙中a、b过程利用的主要生物技术有_____________和______________。
（12分）（1）PstⅠ EcoRⅠ(二者顺序可颠倒) DNA连接酶 启动子
（2）促性腺激素 减数第二次分裂中期（或MⅡ中期） （3）接触抑制 帖壁生长（二者顺序可颠倒） 胰蛋白酶（或胶原蛋白酶） 传代 （4）DAN拼接技术（基因工程） 动物细胞核移植技术
解析试题分析：（1）目的基因的DNA含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ的切割位点，但限制酶SmaⅠ的切割位点位于目的基因上，对SmaⅠ位点进行切割将会破坏目的基因的结构，所以不能用限制酶SmaⅠ对图中对应的位点进行切割。所以要获得含目的基因的重组质粒，应选用PstⅠ、EcoRⅠ限制酶切割。构建重组质粒时，还需要DNA连接酶连接目的基因和质粒切口。基因表达载体包括目的基因+启动子+终止子+标记基因+复制原点。
（2）卵母细胞的采集主要方法是：用促性腺激素处理，使其超数排卵。采集的卵母细胞，需要培养到减数第二次分裂中期后，才能与获能的精子受精。
（3）动物细胞培养过程中会出现接触抑制和贴壁生长现象，故分瓶时需重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。
（4）图乙中a过程利用DNA拼接技术（基因工程）获取含有目的基因的胚胎成纤维细胞，b过程是通过动物细胞核移植技术培养克隆动物。
考点：本题结合转基因克隆牛培育过程图，考查基因工程和动物细胞工程技术的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构，对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论。
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百分学生作业本题练王系列答案科目：高中生物 来源： 题型：综合题
智能温室无土栽培作物,易于管理,优质高产。该项技术广泛应用于现代农业。无土栽培所用营养液中的无机盐在植物体内的作用是 和 。植物因种类和生长发育阶段不同对无机盐的需求也不同,所以应视具体情况调整 。供作物 性吸收无机盐离子。
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科目：高中生物 来源： 题型：综合题
三羟基异黄酮（简称GST）是从豆科植物根部分离得到的一种天然产物。它具有显著的抗癌、抑菌、抗氧化等作用。经研究发现：GST可通过影响细胞凋亡基因（Bcl-2基因和Bax基因）的表达而诱导癌细胞凋亡。科研人员为研究GST对鼻咽癌细胞的影响和作用机制，进行了以下实验。请完善实验并分析回答相关问题。
实验步骤
（1）取5个相同的培养瓶，编号A、B、C、D、E，分别加入等量的培养液。向A瓶接种正常细胞，B、C、D、E瓶接种_____。
（2）向C、D、E瓶中分别加入_____μmol/L GST溶液。其他培养条件相同且适宜。
（3）培养一段时间后，检测并统计______________________________，结果记录于表1。
（4）重复上述步骤，检测、统计_____，结果记录于表2。
| 表1 | Bcl-2基因表达率 | Bax基因表达率 |
| 正常细胞 | 不表达 | 全部表达 |
| 鼻咽癌细胞 | 90% | 19% |
| 5μmol/L GST干预组 | 75% | 58% |
| 10μmol/L)GST干预组 | 49% | 67% |
| 15 μmol/L)GST干预组 | 22% | 85% |
| 表2 | 鼻咽癌细胞凋亡率 |
| 5μmol/L GST干预组 | 15.72% |
| 10μmol/L)GST干预组 | 27.33% |
| 15 μmol/L)GST干预组 | 35.48% |
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科目：高中生物 来源： 题型：综合题
研究发现豚鼠血清对人淋巴瘤细胞有抑制作用，而对正常细胞无影响。进一步研究发现，发挥作用的物质是L—天冬酰胺酶，它能将L—天冬酰胺分解，而淋巴瘤细胞自身不能合成该氨基酸，增殖被抑制。
(1)为验证该酶对两种细胞的影响，某兴趣小组进行了以下实验。
实验材料：正常细胞 淋巴瘤细胞 培养基（含细胞生长所需物质） L—天冬酰胺酶
实验步骤：
a.分组
实验组：培养基+L—天冬酰胺酶+淋巴瘤细胞
对照组：培养基+
b.适宜条件下培养后，观察细胞生长状况，检测L—天冬酰胺含量。
实验结果（如下表）：
结果分析：
该实验利用了酶的 特性；表中①应为 ；对照组细胞内L—天冬酰胺含量正常的原因是 。
(2)患者多次静脉注射该外源性酶后疗效降低，是因为发生了 反应；该酶口服无效，原因是 。
(3)根据实验结果，你认为理想的抗肿瘤药物应该具有的特性是 。
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科目：高中生物 来源： 题型：综合题
下表是筛选异养型细菌的培养基配方。
（1）苯胺是致癌物质，土壤中有分解苯胺的异养型细菌，此培养基中的成分X除了为目的菌提供能源外，还能提供 （写全得分），该培养基从作用看属于 培养基。制备固体培养基时调节PH在 步骤后；对培养基进行灭菌的常用是方法 。
（2）右上图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图。则获得图B效果的接种方法是 。运用A所示接种方法统计的菌落常常比活菌的实际数目 。在探究“酵母菌种群数量变化” 实验已知每个计数室由25×16＝400个小格组成，容纳液体的总体积为0.4mm3，观察到右上图中该计数室所示A.B.C.D.e 5个中格共有蓝藻80个，则1ml样液中约有蓝藻 个
（3）在以尿素为唯一氮源的培养基中加 可初步鉴定该种细菌能够分解尿素，原理用方程式表示为 ；在鉴定培养基是否存在大肠杆菌的过程中，常用到 染色剂。
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科目：高中生物 来源： 题型：综合题
下图1是在发酵罐内利用三孢布拉氏霉发酵生产β-胡萝卜素过程中，菌体生物量及β-胡萝卜素产量随时间变化曲线图。图2是样品层析结果及与β一胡萝卜素标准样的比对。请回答下列问题：
(1)发酵罐内三孢布拉氏霉培养基按物理形态分应为______________________，玉米粉和豆饼为微生物的生长分别主要提供________________。在接入菌种前，应对培养基进行______________，以避免杂菌污染。
(2)图1中，菌体的最快增长出现在第_______h，菌体的生物量到达最大值后下降，其原因是________
_______________，为保证连续的生产，应采取的措施是____________________________________。
(3)β-胡萝卜素常用提取方法为_______法溶解，实验表明，石油醚的提取效果远好于丙酮和酒精，原因是__________________________________。
(4)将萃取的胡萝卜素样品与β一胡萝卜素标样层析后进行比对，结果如图2。从图中分析可知，色带_______为β一胡萝卜素，其余两色带的极性比β-胡萝卜素___________。
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科目：高中生物 来源： 题型：综合题
野兔的毛色由常染色体上的基因控制。等位基因A1、A2、A3分别决定灰色、褐色、白色，它们之间具有不循环而是依次的完全显隐性关系（即如果甲对乙显性、乙对丙显性，则甲对丙也显性，可表示为甲＞乙＞丙），根据遗传系谱图回答问题．
（1）已知A2对A1显性，根据系谱图可确定A1、A2、A3的显性顺序是_______________（用字母和符号表示）。
（2）I2的基因型为________。Ⅲ1与Ⅲ5交配产生灰毛子代的概率为_________。
（3）野兔有一种常染色体单基因遗传病，称作Pelger异常。将Pelger异常的雌雄野兔杂交，后代结果如下：正常雌兔58个，Pelger异常雌兔117个，正常雄兔60个，Pelger异常雄兔119个。出现这种结果的原因最可能是____________________________。
（4）欲探究野兔毛色基因与Pelger异常基因是否位于一对同染色体上，设计实验如下：取Pelger异常的纯种灰毛雄兔与正常的白毛雌兔作为亲本杂交，得F1再用F1中Pelger异常的灰毛雌雄兔相互交配得F2，观察并统计F2表现型及比例（不考虑交叉互换）．
①若灰毛兔与白毛兔之比为 ________，则控制两对相对性状的基因位于一对同染色体上。
②若灰毛兔与白毛兔之比为________，则控制两对相对性状的基因位于非同染色体上。
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科目：高中生物 来源： 题型：综合题
请回答下列有关现代生物技术的问题。
如右图是利用现代生物技术改良草莓品系的过程。
(1)请写出图中涉及的现代生物技术中的2项______________ 。
(2)研究人员根据已知的胰岛素基因序列，采用________方法获得了胰岛素基因。
(3)图中A培育至具有凤梨风味的绿草莓幼苗的过程， _（是、否）体现植物细胞的全能性。
(4)转基因技术和细胞工程在动植物都有广泛应用，但是，胚胎工程只是指对动物的___________________所进行的多种显微操作和处理技术。
(5)不断恶化的生态环境，正在对人类的生存和发展构成严重的威胁。运用生态工程可对遭到破坏的生态环境进行修复和重建。生态工程建设的目的是遵循自然界 的规律，充分发挥资源的生产潜力，防止 ，达到生态效益与经济效益的同步发展。生态工程是实现循环经济最重要的手段之一，请写出它遵循的基本原理中的3项： 。
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科目：高中生物 来源： 题型：综合题
为了探究种子萌发时所进行的细胞呼吸类型，请据所给的材料和用具设计实验：
Ⅰ.实验原理：种子萌发过程中，如只进行需氧呼吸则吸收氧气量和CO2释放量相等；如果进行厌氧呼吸则只释放CO2。（假设以葡萄糖作为细胞呼吸的底物）
Ⅱ.实验材料和用具：萌发的水稻种子、带橡皮塞的玻璃罩2只、100 mL的烧杯4个、2根弯曲的其中带有红色液滴的刻度玻璃管、NaOH溶液、蒸馏水、凡士林。
Ⅲ.实验方法：按照下图将实验材料和用具装好。
Ⅳ．实验分析：装置一中，若萌发的种子需氧呼吸，消耗的O2使气体体积 （增加、不变、减少），产生的CO2被NaOH吸收导致瓶内的气体体积 （增加、不变、减少），从而使液滴向 移动。
V．完成下表，预测实验可能出现的现象及结论。(请描述装置一和二中液滴移动状况)
| 实验现象 | 结论 |
| 一左移，二不移动 | ①______________ __ |
| ②______________ | ③_______ ______ |
| ④______________ | 既进行需氧呼吸，也进行厌氧呼吸 |
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