Question

12．人工瘤胃模仿了牛羊等反刍动物的胃，可用来发酵处理秸秆，提高秸秆的营养价值．为了增强发酵效果，研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株，并对其降解纤维素能力进行了研究．请回答下列问题：

（1）下列操作必需在严格无菌条件下进行的是B．
A．称量培养基的各种成分            B．利用平板划线法接种细菌
C．用酒精擦拭双手                  D．溶化培养基的各种成分
（2）按功能分，筛选该菌株时所用的培养基称为选择培养基培养基；该培养基中必须添加的成分有ACD等．
A．琼脂     B．葡萄糖      C．硝酸铵      D．纤维素
（3）此菌株在培养过程中能被利福平（一种抗生素）抑制，下列微生物中也能被利福平抑制的一组是AC．
A．硝化细菌      B．手足口病毒      C．自生固氮菌      D．小球藻
（4）刚果红可以与纤维素形成红色复合物，但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应．研究人员在刚果红培养基平板上，筛到了几株有透明降解圈的菌落（如图1所示）． 图中降解圈大小与纤维素酶的量与活性有关．初步判断图中降解纤维素能力最强的菌株是①（填图中序号）．
（5）研究人员用筛选到的纤维素酶高产菌株J₁和J₄，在不同温度和 pH 条件下进行发测得发酵液中酶活性的结果见图2，推测菌株J₄更适合用于人工瘤胃发酵，理是发酵过程会产热和产酸，J₄菌株在较高温度和酸性环境下酶的活性更高．

Answer 1

分析 1、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的基本过程为计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板五个步骤．
2、无菌技术：消毒和灭菌

	消毒	灭菌
概念	使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子）	使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法	煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法	灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌
适用对象	操作空间、某些液体、双手等	接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等

3、刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌．

解答 解：（1）A、配制培养基称量时不需要无菌操作，因为配制完成后需要灭菌处理，A错误；
B、平板划线法接种微生物必须进行无菌操作，B正确；
C、用酒精擦拭双手需的目的是进行消毒，C错误；
D、溶化牛培养基的各种成分时不需要无菌操作，因为配制完成后需要灭菌处理，D错误．
故选：B．
（2）根据题意可知，筛选该菌株时所用的培养基称为选择培养基．该培养基为固体培养基，其中必须添加琼脂；需要添加硝酸铵作为氮源；添加纤维素作为唯一的碳源．故选：ACD．
（3）利福平是一种抗生素，能抑制细菌，因此自生固氮菌和硝化细菌能被抑制．小球藻属于真核生物．
（4）在刚果红培养基平板上，筛到了几株有透明降解圈的菌落，降解圈大小与纤维素酶的多少和活性有关．纤维素酶的量越多，活性越强，分解的纤维素越多，透明降解圈越大，所以图中降解纤维素能力最强的菌株是①．
（5）由于胃部PH值较低，根据题意和图示分析可知，发酵过程会产热和产酸，J₄菌株在较高温度和酸性环境下酶的活性更高，所以推测菌株J₄更适合用于人工瘤胃发酵．
故答案为：
（1）B    
（2）选择培养基    ACD      
（3）AC
（4）量与活性      ①
（5）J₄    发酵过程会产热和产酸，J₄菌株在较高温度和酸性环境下酶的活性更高

点评 本题考查微生物分离与培养的相关知识，要求考生识记无菌技术；识记培养基制备的一般过程；识记纤维素分解菌分离实验的原理，能结合图中信息准确答题．