Question

9．科学家将人的干扰素基因与质粒重组后，导入牛的受精卵，并成功从牛奶中提取到了干扰素．请根据如下操作流程回答相关问题．（已知酶I的识别序列和切点是-G↓GATCC-，酶II的识别序列和切点是-↓GATC-）．

（1）基因表达载体的组成主要包括启动子，终止子，标记基因，目的基因．
（2）构建基因表达载体用到的酶是限制性核酸内切酶、DNA连接酶．
（3）据图分析，在构建重组质粒的过程中，目的基因用酶Ⅱ进行了切割，质粒用酶Ⅰ进行了切割．检验重组载体导入能否成功需要利用基因Ⅰ 作为标记基因．
（4）研究人员通常采用技抗原--抗体杂交术检测牛奶中是否含有干扰素．

Answer 1

分析 分析题图：①②表示基因表达载体的构建过程，酶I的识别序列和切点是-G↓GATCC-，酶Ⅱ的识别序列和切点是-↓GATC-，可见限制酶Ⅱ也能识别酶I的识别序列并进行切割，①②过程需用限制酶Ⅱ进行切割；③表示将重组质粒导入受体细胞（受精卵）的过程，常采用显微注射法．

解答 解：
（1）基因表达载体的构建组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因
（2）构建基因表达载体时，用限制酶切割目的基因和运载体，再用DNA连接酶连接形成重组质粒．
（3）在构建基因表达载体时，需用限制酶对目的基因和质粒进行切割以形成相同的黏性末端．质粒如果用限制酶Ⅱ来切割的话，将会在质粒在出现两个切口且抗生素抗性基因全被破坏，故质粒只能用限制酶Ⅰ切割（破坏四环素抗性而保留氨苄青霉素抗性，即将来形成的重组质粒能在含氨苄青霉素的培养基中生存，而在含四环素的培养基中不能生存）；目的基因两端都出现黏性末端时才能和质粒发生重组，故目的基因只有用限制酶Ⅱ切割时，才会在两端都出现黏性末端．构建基因表达载体时，基因I未被破坏，而基因Ⅱ被破坏，所以检验重组载体导人是否成功需要利用基因I作为标记基因．
（4）检测目的基因是否翻译成蛋白质，采用抗原-抗体杂交技术．
故答案为：
（1）启动子      终止子       标记基因       目的基因      
（2）限制性核酸内切酶          DNA连接酶    
（3）酶Ⅱ酶Ⅰ基因Ⅰ
（4）抗原--抗体杂交

点评 本题结合流程图，考查基因工程、蛋白质工程和胚胎工程的相关知识，意在考查考生分析题图提取有效信息的能力；识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系的能力；能运用所学知识解决生物学问题的能力．