Question

【题目】据报道，从部分企业生产的速冻食品中检出葡萄球菌超标，“细菌门”事件引起公众普遍关注。葡萄球菌能分解卵黄中的卵磷脂，在含卵黄的固体培养基上形成的菌落周围会出现特有的乳白色的乳浊环。请回答下列问题。

（1）某兴趣小组欲检测某果汁类食品中含有葡萄球菌，请帮他们完善下列步骤。

①配制培养基：称取适量的牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂等，加入蒸馏水，搅拌加热至完全溶解后调节pH，分装到锥形瓶后进行_____________，在无菌状态下加入卵黄液（100mL10%灭菌NaCl溶液中加一个鸡蛋黄，振荡均匀）摇匀后立即倒平板。

②接种：取待检测果汁2.5mL加入22.5mL灭菌生理盐水中，制成接种样液。

实验组：将接种样液用________________法接种在含卵黄的固体培养基上。

对照组：将______________________用划线法接种在含卵黄的固体培养基上或不接种作为_________对照。

将上述接种后的培养皿同时放在36℃的恒温箱中培养48h。

③观察：观察培养基表面_________________________________________

（2）培养基中的牛肉膏和蛋白胨为葡萄球菌生长和繁殖提供___________________。葡萄球菌能耐受高浓度的NaCl溶液，所以在配制培养基时加入高浓度的NaCl溶液可以将它分离出来，此培养基属于___________培养基。

（3）若要统计某土壤样品中该活菌数目，宜采用________________法，将0.2mL样品稀释100倍，用固体培养基对其培养，最后统计三个平板，菌落数分别是200、180、220。则样品中微生物的数量为__________ 个/mL，该统计结果________ (填“低于”或“高于”)实际值。

Answer 1

【答案】 高压蒸汽灭菌 平板划线 无菌生理盐水 空白 是否出现周围有乳浊环的菌落 碳源和氮源 选择 稀释涂布平板法 105 低于

【解析】 (1)①配制培养基时，分装之后要进行灭菌处理，而对培养基灭菌常用高压蒸汽灭菌法。②根据实验的单一变量原则，对照组使用平板划线法，则实验组也要采用平板划线法；空白对照组不接种，或将25mL无菌生理盐水接种在含卵黄的固体培养基上。③葡萄球菌能分解卵黄中的卵磷脂，在含卵黄的固体培养基上形成的菌落周围会出现特有的乳白色的乳浊环。因此观察时，应该观察培养基表面是否出现周围有乳浊环的菌落。

(2)牛肉膏和蛋白胨中含有蛋白质，故能为葡萄球菌的生长和繁殖提供碳源和氮源；高浓度的NaCl溶液可以把葡萄球菌分离出来，故该培养基属于选择培养基。

(3)接种微生物常用平板划线法和稀释涂布平板法，其中稀释涂布平板法可用于计数活菌数目。根据题意可知，每克土壤中该细菌的含量为（200+180+220）÷3×（1/0.2）×100=105。因为2个或多个细菌连在一起时,在平板上只能观察到一个菌落，因此该方法统计结果低于实际值。