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    【题目】利用紫外线诱变选育高产β-胡萝卜素的三孢布拉霉负菌，未突变菌不能在含有一定浓度的β-紫罗酮的培养基上生长，菌体随β-胡萝卜素含量的增加从黄色加深至橙红色。图甲为选育菌株及提取、获得β-胡萝卜素的流程，请回答下列问题：

    （1）利用紫外线选育高产β-胡萝卜素的三孢布拉霉负菌的原理是_____________。为选出高产突变菌株，应向培养基中添加_______________________，从功能上来看，该培养基属于________培养基。为防止杂菌污染，应对培养基进行_____________________。

    （2）通过__________________方法进行接种，平板经培养后的菌落分布如图乙所示。培养基上只有少数菌能生长形成菌落，原因是______________________________________。

    （3）进行③过程时，应选取________色的菌落接种至液体培养基。提取的胡萝卜素粗品可通过________法进行鉴定。

    【答案】基因突变 一定浓度的β-紫罗酮 选择 （高压蒸汽）灭菌 稀释涂布平板法 基因突变具有低频性，只有少数发生了基因突变的菌才能在含有一定浓度的β-紫罗酮的培养基上生长、繁殖 橙红 纸层析

    【解析】

    1、为了获得高产β-胡萝卜素的三孢布拉霉负菌可通过射线照射发生基因突变；为了筛选高产β-胡萝卜素的三孢布拉霉负菌株，需要在加入一定浓度的β-紫罗酮的培养基中进行选择培养。

    2、分析甲图流程可知，通过稀释涂布平板法接种，得到图乙所示的结果。通过纸层析法鉴定提取的β-胡萝卜素。

    （1）利用紫外线照射选育高产菌株的原理是基因突变。结合题意“未突变菌不能在含有一定浓度的β-紫罗酮的培养基上生长”，为选出高产β-胡萝卜素的三孢布拉霉负菌突变菌株，应向培养基中添加一定浓度的β-紫罗酮。从功能上来看，该培养基具有筛选功能，所以属于选择培养基。为防止杂菌污染，应对培养基进行高压蒸汽灭菌。

    （2）根据图乙所示的菌落分布较为均匀，说明是通过稀释涂布平板法进行接种。由于基因突变具有低频性，所以培养基上只有少数发生了突变菌株才能在含有一定浓度的β-紫罗酮的培养基上生长、繁殖。

    （3）根据题意“菌体随β-胡萝卜素含量的增加从黄色加深至橙红色”，进行③过程时，应选取橙红色的菌落接种至液体培养基。鉴定胡萝卜素粗品常用纸层析法。

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