Question

10．某生物兴趣小组分离提纯葡萄皮上的野生酵母菌时，用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中进行培养．请回答下列问题：

（1）在培养基配制过程中，加入了靑霉素等抗生素，其目的是抑制细菌的生长．纯化酵母菌时，常用的接种方法平板划线法（稀释涂布法）．
（2）该实验小组成功分离出某品种的酵母菌后，用移液器设定1mL的接种世量并分别接种于三个盛有等量液体培养基的锥形瓶中，放置在摇床上培养，设定摇床转速分别为210r/min，230r/min、250r/min，检测结果如上图所示．从图中可看出摇床转速越高，酵母菌繁殖的速度和总量越高，原因是摇床转速越高，提供的氧气越充足．
（3）该小组同学在计数吋观察到酵母菌出现抱团现象．抱团现象可能是酵母菌混合不均造成的，因此取样前将锥形瓶中的培养液充分震荡摇匀，取样吋用吸管来回吹吸若干次．如果该现象是培养液中酵母菌数目过多造成的，需对培养液进行一系列的梯度稀释，稀释10倍的操作方法是吸取1mL 菌液注入盛有9mL水的试管中，并充分混匀．

Answer 1

分析 酵母菌是兼性厌氧型的单细胞真菌，能够进行产酒精的无氧呼吸，酵母菌对青霉素不敏感，酵母菌在有氧条件下可以迅速增殖．进行酵母菌计数时需要将菌液进行梯度稀释．

解答 解：（1）分离野生酵母菌时需要加入青霉素等抗生素的原因是酵母菌对青霉素不敏感，而细菌、放线菌对抗生素敏感，所以培养基中加入青霉素可以抑制细菌的生长．纯化酵母菌时，常用的接种方法是平板划线法（稀释涂布法）．
（2）根据题意可知，摇床转速越高，提供的氧气越充足，从图中可看出摇床转速越高，酵母菌繁殖的速度和总量越高．
（3）进行酵母菌计数时取样前将锥形瓶中的培养液充分震荡摇匀，使酵母菌分散开，取样时需要用吸管来回吹吸若干次使酵母菌充分分散并混匀．进行梯度稀释时稀释10倍的操作方法是吸取1mL菌液注入盛有9mL水的试管中，并充分混匀．
故答案为：
（1）抑制细菌的生长       平板划线法（稀释涂布法）
（2）摇床转速越高，酵母菌繁殖的速度和总量越高   摇床转速越高，提供的氧气越充足
（3）充分震荡摇匀         来回吹吸若干次     9mL水

点评 本题主要考查酵母菌的筛选与分离及培养、计数等知识，意在强化学生对相关知识的理解与运用，题目难度中等．