[题目]血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分.负责血液中和部分的运输.根据血红蛋白的提取和分离流程图.请回答下列问题:(1)凝胶色谱法中所用的凝胶大多数是由等多糖类化合物构成的微小多孔球体.(2)将实验流程补充完整,A为 .B为 .(3)洗涤红细胞次数过少会影响分离效果的原因是 .(4)在装填色谱柱时不能有气泡存在.因为 .降低分离效果,如� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

【题目】血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分，负责血液中和部分的运输。根据血红蛋白的提取和分离流程图（如图），请回答下列问题：

（1）凝胶色谱法中所用的凝胶大多数是由______________等多糖类化合物构成的微小多孔球体。

（2）将实验流程补充完整；A为______________，B为______________。

（3）洗涤红细胞次数过少会影响分离效果的原因是____________________________。

（4）在装填色谱柱时不能有气泡存在，因为____________________________，降低分离效果；如果____________________________，说明色谱柱制作成功。

（5）SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中，SDS能与各种蛋白质结合形成蛋白质-SDS复合物，由于SDS所带负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量，因而掩盖了不同种蛋白质间的电荷差别，从而使电泳的迁移率完全取决于____________________________。

【答案】葡聚糖或琼脂糖血红蛋白的释放凝胶色谱柱的装填无法除去血浆蛋白气泡会扰乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序红色区带均匀一致地移动分子的大小

【解析】

血红蛋白的提取与分离的实验步骤主要有：（1）样品处理：①红细胞的洗涤，②血红蛋白的释放，③分离血红蛋白。（2）粗分离：①分离血红蛋白溶液，②透析。（3）纯化：调节缓冲液面→加入蛋白质样品→调节缓冲液面→洗脱→收集分装蛋白质。（4）纯度鉴定--SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。

（1）凝胶色谱法中所用的凝胶大多数是由葡聚糖、琼脂糖等多糖类化合物构成的微小多孔球体。

（2）血红蛋白的提取和分离流程为：红细胞的洗涤→血红蛋白的释放→分离血红蛋白溶液→透析→凝胶色谱柱的制作→凝胶色谱柱的装填→样品的加入和洗脱。可见，A表示血红蛋白的释放，B表示凝胶色谱柱的装填。

（3）洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白，以利于后续步骤的分离纯化，洗涤次数过少，无法去除血浆蛋白，影响分离效果。

（4）由于气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果，所以在装填凝胶色谱柱时，不得有气泡产生。在蛋白质分离过程中，如果红色区带均匀一致地移动，说明色谱柱制作成功。

（5）SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中，SDS能与各种蛋白质结合形成蛋白质-SDS复合物，由于SDS所带负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量，因而掩盖了不同种蛋白质间的电荷差别，从而使电泳的迁移率完全取决于分子的大小。

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（4）GOC型水稻净光合速率高于野生型水稻，据图1分析其原因是_______。

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