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【题目】2015年11月19日,经过全面的科学论证,美国食品与药品监督管理局(FDA)批准了世界上第一种食用转基因动物——AquAdvantage 转基因大西洋鲑鱼,俗称三文鱼(过程如图①②)。 这种转基因三文鱼生长速度约为普通三文鱼的两倍,可节省75%的饲料成本。如果将抗冻蛋白基因导入番茄可获得抗冻番茄。

(1)①代表的过程是______________,②过程常以鱼的_______为受体细胞。

(2)如图所示,质粒上有AluⅠ、SmaⅠ、PstⅠ、HindⅢ等四种限制酶切割位点,ampr为抗氨苄青霉素基因;抗冻蛋白基因上有PstⅠ、SmaⅠ、AluⅠ等三种限制酶切割位点。在进行③基因表达载体的构建过程中,为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接,在此实例中,应该选用______________两种限制酶对质粒和目的基因进行切割。

(3)构建的基因表达载体中除了目的基因外,还必须有__________终止子、复制原点等。

(4)目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程,称为__________。将基因表达载体导入番茄细胞时,常选择愈伤组织为受体细胞的原因是_______,将目的基因导入番茄细胞最常采用的方法是________法。检测转基因番茄的DNA是否插入了目的基因,常用_______技术。

【答案】目的基因的获取 受精卵 Pst I Sam I 启动子 标记基因 转化 细胞的全能性高 农杆菌转化法 DNA分子杂交技术

【解析】

本题结合图解,考查基因工程的相关知识,要求考生识记基因工程的原理、操作步骤,掌握各操作步骤中需要注意的细节,能准确判断图中各过程的名称,再结合所学的知识准确各选项。

分析题图:图示是将抗冻蛋白基因导入番茄可获得抗冻番茄的过程,其中①表示获取目的基因的过程,②表示将目的基因导入受体细胞的过程,③表示基因表达载体的构建过程,④表示目的基因的检测和表达。

1)①代表目的基因的获取过程;②表示将目的基因导入受体细胞的过程,该过程常以鱼的受精卵为受体细胞。
2)如图所示,质粒上有AluⅠ、SmaⅠ、PstⅠ、HindⅢ等四种限制酶切割位点,ampr为抗氨苄青霉素基因;抗冻蛋白基因上有PstⅠ、SmaⅠ、AluⅠ等三种限制酶切割位点。在进行③基因表达载体的构建过程中,不能用AluⅠ切割,这样会破坏目的基因;不能用PstI一种酶切割,这样可能会导致酶切后产生的末端发生任意连接;不能用HindⅢ切割,因为含有目的基因的DNA分子上没有该酶的切割位点。因此,在此实例中,为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接,应该选用PstI和 SamI两种限制酶对质粒和目的基因进行切割。
3)基因表达载体的组成包括目的基因、启动子、标记基因、终止子、复制原点等。
4)目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程,称为转化。将基因表达载体导入番茄细胞时,常选择愈伤组织为受体细胞,原因是细胞的全能性高;将目的基因导入植物细胞最常采用农杆菌转化法.检测转基因番茄的DNA是否插入了目的基因,常用DNA分子杂交技术。

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