Question

在农业生产中发现一种广泛使用的除草剂（含氮有机化合物）在土壤中不易降解，长期使用可污染土壤．为修复被该除草剂污染的土壤，可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌（已知该除草剂在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明）．

（1）制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行

 

处理．
（2）要在长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌，从物理性质、用途方面来看，上述培养皿中的培养基应具有的特点是：在

 

 的培养基中加入

 

．
（3）在划线培养时，只有很少菌落出现，大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是

 

．
（4）在固体培养基上形成的菌落中，无透明带菌落利用的氮源主要是

 

，有透明带菌落利用的氮源主要是

 

，据此可筛选出目的菌．
（5）若实验接种时用的是稀释涂布平板法，在统计菌落数目时得到4个平板，统计的数目分别为21、213、257、278，则对数据处理后取平均值计数为

 

，该方法往往比活菌的实际数目偏

 

（高/低）．

Answer 1

考点：微生物的分离和培养,测定某种微生物的数量,培养基对微生物的选择作用

专题：

分析：据图分析：该实验是从土壤中筛选分离能降解除草剂的微生物的过程．这样的实验要将土壤稀释处理，以除草剂为唯一的氮源进行处理筛选土壤微生物，以菌落计数法进行统计计数．

解答： 解：（1）1）制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行稀释处理．
（2）从物理性质方面来看，题图培养皿中培养基属于固体培养基；从用途方面来看，该培养皿中培养基属于选择培养基．该除草剂为含氮有机化合物，降解该除草剂的细菌可以除草剂为氮源．故该培养基中除加入除草剂外，不再含有其他氮源，以选择出能降解该除草剂的细菌．
（3）在以该除草剂为唯一氮源的培养基上，不能降解该除草剂的细菌（除具有固氮能力的细菌外）是不能生长的．
（4）无透明带菌落利用的氮源主要是氮气，含一定量该除草剂的培养基不透明，形成透明圈是由于该除草剂被某些细菌降解．
（5）在统计菌落数目时得到4个平板，统计的数目应该选择数据接近的三个平板，分别为213、257、278，取平均值为249；由于一些菌落在生长过程中会长在一起，该方法往往比活菌的实际数目偏低．
故答案为：
（1）稀释　
（2）无氮固体    该种除草剂  
（3）培养基中缺少这些细菌可利用的氮源      　
（4）氮气　该除草剂　   
（5）249    低

点评：本题考查微生物培养的实验，意在考查实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用及实验分析能力．