Question

4．科学家从某些能无限增殖的细胞质中分离出无限增殖的调控基因（prC），该基因能激发许多动物细胞分裂，这为单克隆抗体的制备提供了更为广阔的前景．请回答以下问题．
（1）利用细胞融合技术制备单克隆抗体，促进动物细胞融合常用的诱导剂是灭活的病毒．
（2）利用细胞融合技术制备单克隆抗体时有两次筛选，第2次筛选的目的是筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞．
（3）有人提出，可以直接通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，其思路如图1所示．请回答下列问题．

①酶B是指DNA连接酶．
②题目中Ⅱ所指的细胞是浆细胞，Ⅲ所指的细胞具有的特点是既能无限增殖又能产生特定抗体．
（4）也有人提出用细胞核移植技术构建重组细胞来生产单克隆抗体，试用相关的图示及文字在图2中表示该过程：
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Answer 1

分析 传统的单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原，从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体．
基因工程的方法：由于效应B细胞没有细胞增殖的能力，因此选择“无限增殖调控基因（prG）”作为目的基因，“效应B细胞”作为受体细胞，以期望获得既能无限增殖、又能产生特异性抗体的效应B细胞．
细胞核移植技术生产单克隆抗体：由于某些能无限增殖的细胞的细胞质中含有无限增殖调控基因（prG），因此在细胞核移植时，选择效应B细胞的细胞核和骨髓瘤细胞的细胞质进行细胞核移植．

解答 解：（1）利用细胞融合技术制备单克隆抗体，促进动物细胞融合常用的诱导因素是灭活的病毒．
（2）利用细胞融合技术制备单克隆抗体时有两次筛选，第1次筛选的目的是筛选出杂交瘤细胞，第2次筛选的目的是筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞．
（3）①在基因工程中，获取目的基因和质粒需要使用限制酶，然后在DNA连接酶的作用下形成重组质粒．
②题目中Ⅱ所指的细胞是能产生抗体的浆细胞，Ⅲ所指的是导入无限增殖的调控基因（prC）的浆细胞具有的特点是
既能无限增殖又能产生特定抗体．
（4）由于调控细胞无限增殖的prG基因位于细胞质中，因此若要采用细胞核移植获得单克隆抗体时，只能讲浆细胞的细胞核移入到含有prG基因的细胞质中，获得重组细胞，最终获得单克隆抗体．如图：

故答案为：
（1）灭活的病毒
（2）筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞
（3）①DNA连接酶
②浆细胞　既能无限增殖又能产生特定抗体
（4）如图

点评 本题考查基因工程、动物细胞核移植和单克隆抗体的制备过程，比较综合．答题时要注意题干中的信息，如利用细胞核移植获得单克隆抗体时，只能将浆细胞的细胞核移植到去核的含有prG基因的细胞质中，因为根据题干可知，prG基因只存在于能无限增殖细胞的细胞质中．