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【题目】下面是某同学制作果酒和果醋的实验流程图以及分离土壤中能分解尿素的细菌的培养基配方。请回答有关问题:

KH2PO4

Na2HPO4

MgSO47H2O

蛋白胨

葡萄糖

尿素

琼脂

1.4g

2. 1g

0.2g

1.0g

10.0g

1.0g

15.0g

预分离土壤中能分解尿素的细菌的培养基配方

(1)图中方框内应该填写的实验步骤是___________,此步骤中起主要作用的微生物是___________,其发酵时___________(填“需要”或“不需要”)氧气,适宜的发酵温度范围是___________

(2)根据培养基的成分判断,该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌?___________(填“能”或“不能”),原因是_________________________________

(3)如果想进一步对初步筛选得到的菌株进行纯化并计数,可采用的接种方法是_________________。通常鉴定分解尿素的细菌的方法是在培养基中加入___________指示剂。

【答案】醋酸发酵(或果醋发酵)醋酸菌需要30~35℃不能培养基中的氮源还有蛋白胨(尿素不是唯一氮源),不能选择出只以尿素为氮源的微生物稀释涂布平板法酚红

【解析】

由题文的描述和图表分析可知:该题考查学生对果酒与果醋的制作、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数等相关知识的识记和理解能力。

(1)题图显示:通过图中方框内的实验步骤后,得到了果醋,因此图中方框内应该填写的实验步骤是醋酸发酵(或果醋发酵)。在果醋发酵中,起主要作用的微生物是醋酸菌。醋酸菌是好氧菌,所以发酵时需要氧气。醋酸菌的最适生长温度为30~35℃,所以在果醋的制作过程中,需将培养温度控制在30~35℃范围内。

(2)从土壤中分离出分解尿素的细菌,应以尿素为唯一氮源,而该培养基配方中的氮源,除了尿素外,还有蛋白胨,即尿素不是唯一氮源,所以该同学不能从土壤中分离出分解尿素的细菌。

(3) 对初步筛选得到的菌株进行纯化并计数,可采用稀释涂布平板法对该菌株进行接种。在细菌分解尿素的化学反应中,细菌合成的脲酶将尿素分解成氨,氨会使培养基的pH升高,酚红指示剂将变红,因此在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,即可初步鉴定所培养的细菌是否可以分解尿素。

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