Question

13．含有重金属离子的废水直接排入水体，会导致水生动物中毒，毒性的表现与离子浓度和染毒时间正相关．为了验证铅离子对鲫鱼肝胰脏细胞内过氧化氢酶活性的影响，请根据以下提供的材料和用具，完善实验思路，预测实验结果并进行分析．
材料与用具：鲫鱼、铅染毒溶液、匀浆器、试管、H₂O₂磷酸缓冲液等．
（要求和说明：H₂O₂磷酸缓冲液由H₂O₂和磷酸缓冲液组成，其中的H₂O₂含量可用光电比色法测定，具体检测过程不要求写出）
请回答：
（1）实验思路：
①染毒饲养：取3个水族箱，分别加入等量铅浓度为0、20、40mg/L的铅染毒溶液，每个水族箱饲养20尾鲫鱼．
②制备酶液：染毒开始时及过程中每隔24小时，每组捕捉4尾鲫鱼，取每尾鱼的肝胰脏 0.5g打成匀浆，并制备成酶提取液．
③测酶活性：取试管加入H₂O₂磷酸缓冲液和酶提取液，反应3分钟立即测定试管中的H₂O₂含量．
④对实验数据进行统计分析．
（2）预测实验结果：（在坐标系中用柱状图表示第1次、第5次的实验结果）

（3）分析与讨论：
①下列关于将肝胰脏制备成酶提取液的叙述错误的是D．
A．将肝胰脏打成匀浆有利于提取酶
B．应该将0.5g克肝胰脏制备成等体积的酶液
C．提取的酶液应该加入磷酸缓冲液并低温保存
D．直接使用匀浆进行实验对实验结果没有影响
②将H₂O₂配制成H₂O₂磷酸缓冲液是为了保证反应过程中的pH适宜．

Answer 1

分析 根据题干信息可知“毒性的表现与离子浓度和染毒时间正相关”，由此可见实验的自变量为离子浓度和染毒时间，实验的因变量为H₂O₂含量．

解答 解：（1）③根据实验思路可知，实验需要测定胰脏细胞内过氧化氢酶活性，因此需要取试管加入H₂O₂磷酸缓冲液和酶提取液，反应3分钟立即测定试管中的H₂O₂含量．
④对实验数据进行统计分析．
（2）由于题干中提出，毒性的表现与离子浓度和染毒时间正相关，因此预测实验结果如图：
（3）①A．酶存在于胰脏细胞内，因此将胰脏打成匀浆有利于提取酶，A正确；
B．应该将0.5g干胰脏制备成等体积的酶液，以保证酶溶液的浓度相等，B正确；
C．提取的酶液应该加入磷酸缓冲液并低温保存，防止影响酶的活性，C正确；
D．匀浆中含有其它化学物质，可能会影响反应速率，因此直接使用匀浆进行实验对实验结果有影响，D错误．
故选：D．
②将H₂O₂配制成H₂O₂磷酸缓冲液是为了保证反应过程中的pH适宜．
故答案为：
（1）③H₂O₂磷酸缓冲液   酶提取液   H₂O₂含量  ④对实验数据进行统计分析
（2）
（3）①D    ②pH适宜

点评 本题考查了探究影响酶活性的因素的有关的实验，要求考生能够掌握实验原理、方法，根据实验目的设计实验步骤，并对实验进行完善和修订，具有一定的难度．