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    【题目】据统计，维生素A缺乏每年导致67万名五岁以下儿童死亡。因此科学家研发了一种通过基因工程使得稻米的食用部分胚乳含有维生素A的前体——胡萝卜素的大米，胡萝卜素在人体内会转化成维生素A，可以缓解人体维生素A缺乏。这种大米的制作过程应用了根癌农杆菌介导法进行转基因操作，将能够合成胡萝卜素的酶的基因重组后导入大米的基因组中，具体原理如下图所示。

    （1）图10原理中X表示______________________；Y过程表示________________________。

    （2）图10中Z过程需要用到的植物激素是________（多选）

    A．生长激素 B．细胞分裂素 C．赤霉素 D．脱落酸 E．乙烯 F．吲哚乙酸

    根癌农杆菌介导法转基因需要利用根癌农杆菌的Ti质粒完成，图11是Ti质粒的具体组成。（T-DNA区大小约17kb）

    （3）若将图11质粒用限制酶I与限制酶II进行完全酶切（各个片段大小不一致），并用凝胶电泳分离酶切后的片段，电泳时分子量越小扩散越快，则电泳结果应为图12（箭头为电泳方向）中的____________。

    （4）为了筛选符合条件的农杆菌，可以在培养基中加入卡那霉素进行筛选。则可以在此培养基中生存的农杆菌类型为________________________________________________。

    （5）根癌农杆菌介导法转基因原理如图13所示。当植物受伤时会产生一种信号分子，该信号会作用于农杆菌细胞表面的____________。试分析接受信号分子后农杆菌将T-DNA导入植物细胞的过程：___________________________________________________________________________________________。

    【答案】（1）重组质粒 重组质粒导入农杆菌

    （2）BF

    （3）A

    （4）导入未重组的Ti质粒农杆菌及导入重组质粒的农杆菌

    （5）受体 ①激活vir区表达蛋白装配成通道复合体．②激活vir区表达蛋白以诱导T-DNA区形成T复合体通过通道复合体进入植物细胞后整合进入植物基因组DNA

    【解析】

    试题分析：（1）图1原理中X表示通过构建基因表达载体形成的重组质粒；Y过程表示将重组质粒导入农杆菌．

    （2）图1中Z过程表示植物组织培养，需要用到的植物激素是生长素和细胞分裂素．

    （3）由于T-DNA区大小约17kb，所以将图3质粒用限制酶I与限制酶II进行完全酶切（各个片段大小不一致），并用凝胶电泳分离酶切后的片段，则电泳结果应为如图4中的A．

    （4）由于质粒中含有卡那霉素抗性基因，所以在培养基中加入卡那霉素进行筛选，结果可以在此培养基中生存的农杆菌类型为导入未重组的Ti质粒农杆菌及导入重组质粒的农杆菌．

    （5）根癌农杆菌介导法转基因原理如图5所示．当植物受伤时会产生一种信号分子，该信号会作用于农杆菌细胞表面的受体．

    接受信号分子后农杆菌将T-DNA导入植物细胞的过程为：

    ① 激活vir区表达蛋白装配成通道复合体．

    ②激活vir区表达蛋白以诱导T-DNA区形成T复合体通过通道复合体进入植物细胞后整合进入植物基因组DNA．

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