Question

4．（1）在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑温度、酸碱度和渗透压等条件．由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、易培养、生活周期短等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料．
在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行灭菌（消毒、灭菌）；操作者的双手需要进行清洗和消毒；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能损伤DNA的结构．
（2）若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的比例合适．通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的鉴定（或分类）．
（3）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染．对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生．若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散．

Answer 1

分析 大肠杆菌属于细菌，是原核生物．微生物营养成分主要有碳源、氮源、水和无机盐等，另外还需要注意渗透压、温度、pH 等条件．大肠杆菌常作为遗传学研究的实验材料．微生物培养的关键是无菌技术，防止外来杂菌的污染．

解答 解：（1）大肠杆菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、易培养、生活周期短等优点，培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑温度、酸碱度和渗透压等条件．灭菌是用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，所以对培养基和培养皿进行灭菌；消毒是用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物，操作者的双手需要进行清洗和消毒，紫外线能使蛋白质变性，还能损伤DNA的结构．
（2）稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养，应保证样品稀释的比例适合．对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的鉴定．
（3）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染．对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生．因为有的大肠杆菌会释放一种强烈的毒素，并可能导致肠道出现严重症状，使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散．
故答案为：
（1）温度    酸碱度    易培养   生活周期短    灭菌   消毒   损伤DNA的结构
（2）比例合适鉴定（或分类）
（3）将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生     灭菌

点评 本题主要考查微生物培养的相关知识，要求考生能够识记大肠杆菌的培养条件以及其作为遗传实验的优点，区分掌握不同材料消毒和灭菌的方法，识记菌种鉴定的方法等，属于基础题．