Question

【题目】（一）回答下列与果酒和果醋的制作的有关问题：

（1）葡萄酒是酵母菌在无氧条件下的发酵产物，即将____________氧化成乙醇，当培养液中乙醇的浓度超过____________时，酵母菌就会死亡。果醋则是醋杆菌在有氧条件下将____________氧化而来的。

（2）用葡萄汁制葡萄酒：发酵瓶装量不能超过____________。开始时，酵母菌的____________会使发酵瓶出现负压，原因是________________________，若这种负压情况持续3天以上，必须加入____________，使发酵尽快发生。

（二）某研究小组欲利用抗虫基因，通过农杆菌转化法培育抗虫玫瑰。图1和图2分别表示出了抗虫基因和农杆菌Ti质粒的限制性核酸内切酶识别位点和抗生素抗性基因（pstⅠ、Sma Ⅰ、Alu Ⅰ表示限制性核酸内切酶切割位点；amp为氨苄青霉素抗性基因，tet为四环素抗性基因）请回答：

（1）为获得大量抗虫基因，且保证形成重组质粒时，目的基因以唯一方向接入，可选用_________（填限制酶的种类）分别切割目的基因和Ti质粒，再用 DNA连接酶连接，形成重组DNA分子，再与经过________处理的______________（A.有amp和tet B.有amp，无tet C.无amp，有tet D.无amp和tet）农杆菌液混合，使重组DNA进入农杆菌。再利用农杆菌转入培养的玫瑰细胞，使目的基因导入玫瑰细胞中。

（2）将含有导入了目的基因的玫瑰细胞的试管放在______________上，进行液体悬浮培养获得胚性细胞，进而培育成抗虫玫瑰。

（3）这种借助基因工程方法，将外源基因导入受体细胞，再通过这些转基因细胞进行培养，获得具有特定性状的新植株的技术就是______________。

（4）当前多地过度开发旅游造成生态环境的破坏，为减缓生态环境的破坏，可发展__________工程，并在旅游区种植抗虫玫瑰，可有效降低农药对环境的污染，并获得较佳的经济效益、社会效益和__________。

Answer 1

【答案】 葡萄糖 16% 乙醇 2/3 需氧呼吸（或有氧呼吸） 需氧呼吸消耗O2，产生CO2，但CO2溶解度大于O2，使发酵瓶内气体量减少形成负压 酵母 Sma I和PstI CaCl2 D 摇床 植物细胞工程技术 生态旅游 生态效益

【解析】本题考查果酒和果醋的制作、基因工程等生物技术及其应用等知识，要求考生掌握果酒和果醋的制作原理和方法，熟练进行发酵操作；能利用所学知识解读图形，选择合适的限制酶获取目的基因并切割质粒形成重组DNA分子；掌握基因工程的操作程序及其应用，了解植物细胞工程技术及生态工程。

（一）（1）葡萄酒是酵母菌在无氧条件下的发酵产物，即将葡萄糖氧化成乙醇；当培养液中乙醇的浓度超过16%时，酵母菌就会死亡。果醋则是醋杆菌在有氧条件下将乙醇氧化而来的。

（2）用葡萄汁制葡萄酒时，发酵瓶装量不能超过2/3。开始时，酵母菌的需氧呼吸（或有氧呼吸）会使发酵瓶出现负压，原因是需氧呼吸消耗O2，产生CO2，但CO2溶解度大于O2，使发酵瓶内气体量减少形成负压；若这种负压情况持续3天以上，必须加入酵母，使发酵尽快发生。

（二）（1）分析图一可知，获取目的基因可用限制酶SmaI和PstI或只使用PstI，切割质粒时必需保证标记基因不能全部被破坏，因此为获得大量抗虫基因，且保证形成重组质粒时，目的基因以唯一方向接入，可选用Sma I和PstI分别切割目的基因和Ti质粒，再用 DNA连接酶连接，形成重组DNA分子，此时的重组DNA分子中的标记基因为amp；再与经过CaCl2处理（使其成为感受态细胞）的无amp和tet的农杆菌液混合，使重组DNA进入农杆菌。再利用农杆菌转入培养的玫瑰细胞，使目的基因导入玫瑰细胞中。

（2）将含有导入了目的基因的玫瑰细胞的试管放在摇床上震荡，进行液体悬浮培养获得胚性细胞，进而培育成抗虫玫瑰。

（3）这种借助基因工程方法，将外源基因导入受体细胞，再通过这些转基因细胞进行培养，获得具有特定性状的新植株的技术就是植物细胞工程技术。

（4）当前多地过度开发旅游造成生态环境的破坏，为减缓生态环境的破坏，可发展生态旅游工程，并在旅游区种植抗虫玫瑰，可有效降低农药对环境的污染，并获得较佳的经济效益、社会效益和生态效益。