Question

5．土壤酶是由土壤微生物产生的，具有催化作用的一类蛋白质，如脲酶、蔗糖酶等．土壤酶易受到环境中外源物质（如除草剂、重金属、肥料等）的影响．科学家研究了氟磺胺草醚和甲咪唑烟酸两种除草剂对土壤中脲酶和蔗糖酶活性的影响．
（1）研究者从近年未喷洒（填“喷洒”或“未喷洒”）过除草剂的环境中选取表层土壤作为实验样品．
（2）各实验组称取200g的土壤置于棕色广口瓶中，分别添加等量的不同质量浓度的除草剂溶液，同时设置空白对照组．广口瓶用脱脂棉（填“脱脂棉”或“保鲜膜”）封口，置于恒温培养箱中培养．分别在培养不同天数后取样，测定土壤中脲酶和蔗糖酶的活性．结果如表所示．

除草剂		脲酶活性				蔗糖酶活性
	处理时间 处理（mg/kg）	3天	9天	25天	40天	3天	9天	25天	40天
氟磺胺草醚	对照	1.78	1.94	2.33	2.77	11.2	11.5	10.0	10.1
	0.05	1.53	1.90	2.38	2.78	10.8	12.5	11.7	12.2
	0.5	1.43	1.93	2.43	2.89	10.4	12.5	11.6	10.9
	5	1.65	1.84	2.38	2.72	9.3	9.3	10.9	10.4
甲咪唑烟酸	对照	1.78	1.94	2.33	2.77	11.3	11.5	10.4	10.6
	0.05	1.58	2.08	2.40	2.50	10.9	10.8	11.1	11.3
	0.5	1.59	1.87	2.40	2.44	10.1	10.9	10.3	10.5
	5	1.65	1.97	2.39	2.41	10.3	10.0	10.5	11.9

（3）本实验的自变量是处理时间、除草剂的种类和浓度．实验结果显示，两组除草剂中的甲咪唑烟酸的各实验组对土壤脲酶活性的影响随时间变化，均呈现“抑制-激活-抑制”的趋势．对土壤蔗糖酶活性激活率最高的处理条件是0.05mg/kg氟磺胺草醚处理40天．
（4）欲从上述土壤中筛选出蔗糖分解菌或尿素分解菌，则应将土壤浸出液采用稀释涂布平板（或“平板划线”）法接种到经高压蒸汽灭菌法处理的相应的固体平板培养基上．

Answer 1

分析 1、微生物常见的接种的方法：
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．
2、分析表格可知，实验的自变量为氟磺胺草醚和甲咪唑烟酸的浓度以及处理时间，因变量为脲酶活性和蔗糖酶活性．

解答 解：（1）分析题意可知，土壤酶易受到环境中外源物质（如除草剂、重金属、肥料等）的影响，因此要获得该种微生物，研究者应从近年未喷洒过除草剂的环境中选取表层土壤作为实验样品．
（2）脱脂棉透气，因此广口瓶用脱脂棉封口，置于恒温培养箱中培养．分别在培养不同天数后取样，测定土壤中脲酶和蔗糖酶的活性．
（3）分析表格可知，本实验的自变量是处理时间、除草剂的种类和浓度．实验结果显示，两组除草剂中的甲咪唑烟酸的各实验组对土壤脲酶活性的影响随时间变化，均呈现“抑制-激活-抑制”的趋势．对土壤蔗糖酶活性激活率最高的处理条件是0.05mg/kg氟磺胺草醚处理40天．
（4）欲从上述土壤中筛选出蔗糖分解菌或尿素分解菌，则应将土壤浸出液采用稀释涂布平板（或“平板划线”）法接种到经高压蒸汽灭菌法处理的相应的固体平板培养基上．
故答案为：
（1）未喷洒
（2）脱脂棉
（3）处理时间、除草剂的种类和浓度      甲咪唑烟酸 0.05mg/kg氟磺胺草醚处理40天
（4）稀释涂布平板（或“平板划线”）        高压蒸汽

点评 本题考查了微生物分离与培养的有关知识知识，要求考生能够掌握微生物常见的接种的方法，掌握对照实验的原则，能够根据表格数据的分析确定实验的自变量和因变量，以及相应的实验结论．