Question

兴趣小组在学习完“蛋白质的提取和分离”后，联系相关实验，准备从猪肝脏研磨液中初步提取过氧化氢酶，设计的“过氧化氢酶提取、分离流程图”如下：

试回答下列有关问题：

(1)向肝细胞悬液中加入一定量的pH＝7.0的缓冲液并充分搅拌，可以破碎肝细胞，破碎细胞的原理是__________。与使用蒸馏水相比，使用缓冲液的优点是______。

(2)蛋白质粗分离阶段透析的目的是________。

(3)电泳利用了待分离样品中各种分子的________等的差异，而产生不同迁移速度，实现各种分子的分离。

(4)实验小组以3%过氧化氢溶液和获得的过氧化氢酶为材料进行温度对酶催化活性影响的探究，得到如图所示的结果，根据实验结果得出“过氧化氢酶能耐受100 ℃高温”的结论，请问这一结论是否可靠？为什么？________。

 

Answer 1

(1)渗透原理(当外界溶液浓度低于动物细胞内液浓度时，细胞吸水涨破)　可以保证酶溶液pH基本稳定，避免因pH变化影响过氧化氢酶活性

(2)除去小分子化合物(杂质)

(3)带电性质、分子大小、形状(答对两项得分)

(4)不可靠，高温也能使过氧化氢分解

 

(1)酶的活性受酸碱度、温度等条件的影响。使用缓冲溶液可达到细胞因吸水而涨破的目的，又不会因溶液酸碱度不适宜而影响酶的活性。(2)透析去除分子量较小的杂质，即样品的粗分离。(3)电泳技术就是在电场的作用下，利用待分离样品中各种分子带电性质以及分子本身大小、形状等性质的差异，使带电分子产生不同的迁移速度，从而达到对样品进行分离、鉴定或提纯的目的。(5)在该实验中温度应是实验变量，所以为了确保实验结果的可靠性，应该排除其他的能导致过氧化氢分解的因素。