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【题目】科学家用植物细胞杂交方法,将番茄的原生质体和马铃薯的原生质体融合,成功地培育出了“番茄-马铃薯”杂种植株,如图1所示,其中①~⑤表示过程,英文字母表示细胞、组织或植株。育种工作者还利用番茄进行了如下三组实验如图2。据图回答下列问题:

(1)实现过程②之前需用法除去细胞壁。与过程③密切相关的具有单层膜结构的细胞器为
(2)过程②后,在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的存在,这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。
(3)若番茄细胞内有m条染色体,马铃薯细胞含n条染色体,则“番茄-马铃薯”细胞内含条染色体;若杂种细胞培育成为“番茄-马铃薯”植株为四倍体,则此杂种植株的花粉经离体培育得到的植株属于倍体植株。
(4)如果形成c的a、b原生质体都来自番茄细胞,那么更简单的得到番茄植株f的处理方法是
(5)若杂种植株在有丝分裂在过程中,仅保留番茄的染色体而马铃薯的染色体会不断丢失,采用特异性引物对番茄和马铃薯基因组DNA进行PCR扩增,得到两亲本的差异性条带,可用于杂种植株的鉴定。图3是用该引物对双亲及4棵再生植株1~4进行PCR扩增的结果。据图判断,再生植株1~4中一定是杂种植株的有(多选)

(6)图2 Ⅰ过程培育植物体A主要应用了技术。
(7)用红果多室(Yymm)番茄植株的花粉进行Ⅱ、Ⅲ有关实验,则Ⅱ过程中,培育植物体B的方法(Ⅱ)称为。植物体C的基因型有。(细胞A为两两融合细胞,写出具体的基因型。)
(8)三种育种得到的植物体A,B,C中一定为纯合体的是

【答案】
(1)酶解;高尔基体
(2)叶绿体
(3)m+n;单
(4)用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗
(5)1、2、4
(6)植物组织培养技术
(7)单倍体育种;YYmm或Yymm或yymm
(8)植物体B
【解析】(1)实现过程②之前需用酶解法除去细胞壁;过程③为再生新的细胞壁,高尔基体与细胞壁的形成有关。(2)过程②后,在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的叶绿体,可作为初步筛选杂种细胞的标志。(3)植物体细胞杂交获得的杂种植株染色体数目是两种植物染色体数目之和,即m+n;配子发育成的植株一定是单倍体。(4)若a、b原生质体都来自番茄细胞,得到的杂种植株实际上相当于番茄的染色体数目加倍的植株,因此另一种得到这样植株的方法是用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗。(5)根据图谱,番茄含有碱基对为300 和600 的DNA 片段,马铃薯还有碱基对为1000、1300 和1500 的片段,再生植株3,只含有长度为300 和600 的片段,与番茄一致,1、2、4 既含有马铃薯DNA 片段,又含有番茄DNA 片段,为杂种植株。(6)图2 Ⅰ培育植物体采用了植物组织培养技术。(7)II过程属于单倍体育种。由于红果多室(Yymm)番茄植株可产生Ym和ym两种花粉,则Ⅲ过程中植物体C的基因型YYmm或Yymm或yymm。(8)三种育种得到的植物体A、B、C中一定为纯合体的是只有植物体B,因为植物体B是由单倍体经秋水仙素处理后,染色体数目加倍,基因也加倍。
植物体细胞杂交技术:

分析图1,①表示通过酶解法去除细胞壁获得原生质体a和b,②表示通过物理或化学方法诱导原生质体融合成c,③表示再生细胞壁形成杂种细胞d,④表示脱分化形成愈伤组织e的过程,⑤表示再分化形成完整植株。分析图2,Ⅰ是植物组织培养,Ⅱ是单倍体育种,Ⅲ花粉细胞融合。

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