Question

【题目】我国曾经发生过因“非典型性肺炎”而死亡的病例，经研究发现，该病是由SARS病毒(一种RNA病毒)感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康复后的血清中有抗S蛋白的特异性抗体。某研究小组为了研制预防SARS病毒的疫苗，开展了前期研究工作，其简要的操作流程如图：

(1)实验步骤①所代表的反应过程是______________________。

(2)步骤②构建重组表达载体A和重组表达载体B必须使用限制酶和________酶，后者的作用是将用限制性核酸内切酶切割的S蛋白基因和________________连接起来。

(3)如果省略步骤②而将大量扩增的S蛋白基因直接导入大肠杆菌，一般情况下，不能得到表达的S蛋白，其原因是S蛋白基因在大肠杆菌中不能________________，也不能________________。

(4)为了检验步骤④所表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同的免疫反应特性，可用_________________与SARS康复病人血清进行抗原—抗体特异性反应实验，从而得出结论。

(5)步骤④和⑥的结果相比，原核细胞表达的S蛋白与真核细胞表达的S蛋白的氨基酸序列________(填“相同”或“不同”)，根本原因是______________________。

Answer 1

【答案】（1）逆转录 （2）DNA连接 载体 S基因（3）复制 合成S基因的mRNA（4）大肠杆菌中表达的S蛋白 SARS康复病人血清（5）相同 表达蛋白质所用的基因相同

【解析】试题分析：⑴据图可知，过程①是以RNA为模板合成DNA的过程，即是逆转录。⑵基因表达载体的构建需要使用限制酶和DNA连接酶；DNA连接酶的作用是将目的基因和运载体连接在一起。⑶若把S基因直接导入大肠杆菌，S基因很难把自己整合到细菌的DNA上，这样的S基因是无法复制和转录的；要想检验大肠杆菌中表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同作用，必须要获得病毒S蛋白，根据免疫知识，SARS康复病人血清应该含有该物质。⑷检测蛋白质的方法是抗原抗体杂交，即将大肠杆菌中表达的S蛋白与SARS康复病人血清（含有抗S蛋白的抗体）结合。⑸由于基因相同，因此所表达的蛋白质中氨基酸序列也应相同。