Question

【题目】铁皮石斛是我国名贵中药，生物碱是其有效成分之一。应用组织培养技术培养铁皮石斛拟原球茎(简称PLBs，类似愈伤组织)生产生物碱的实验流程如下：

在固体培养基上，PLBs的重量、生物碱含量随增殖培养时间的变化如图所示，请回答下列问题：

（1）选用新生营养芽为外植体的原因是____________________，诱导外植体形成PLBs的过程称________。

（2）与黑暗条件下相比，PLBs在光照条件下生长的优势体现在______________，______________，________________。

（3）脱落酸(ABA)能提高生物碱含量，但会抑制PLBs的生长。若采用液体培养，推测添加适量的ABA可提高生物碱产量。同学们拟开展探究实验验证该推测，在设计实验方案时探讨了以下问题：

①ABA的浓度梯度设置和添加方式：设4个ABA处理组，1个空白对照组，3次重复。因ABA受热易分解，故一定浓度的无菌ABA母液应在各组液体培养基______后按比例加入。

②实验进程和取样：实验50天完成，每10天取样，将样品(PLBs)称重(g/瓶)后，再测定生物碱含量。如初始(第0天)数据已知，实验过程中还需测定的样品数为________。

③依所测定数据确定适宜的ABA浓度和培养时间：当某3个样品(重复样)的__________________________时，其对应的ABA浓度为适宜浓度，对应的培养时间是适应培养时间。

Answer 1

【答案】

（1）细胞分化程度低，容易诱导形成PLBs 细胞的脱分化

（2）生长起始较快 快速生长时间较长 PLBs产量较高

（3）①灭菌、冷却

②75

③PLBs重量和生物碱含量乘积的平均值最大

【解析】

（1）新生营养芽分裂能力强，细胞分化程度低，容易诱导形成PLBs；根据题干可知，PLBs类似愈伤组织，外植体形成愈伤组织的过程是脱分化。

（2）据图分析，光照下PLBs的重量高于黑暗条件下，PLBs在光照条件下生长的优势体现生长起始较快，快速生长时间较长，PLBs产量较高。

（3）①由于ABA受热易分解，所以各种液体培养基灭菌并冷却后才能按比例加入一定浓度的无菌ABA母液。

②分析图解可知，4个ABA处理组，1个空白对照组，共5组，50天每10天取样，需要取样5次，3次重复，即5×5×3＝75。故实验过程中还需测定的样品数为75。

③PLBs(类似愈伤组织)重量与生物碱含量呈正相关，故当某3个样品(重复样)的PLBs重量和生物碱含量乘积的平均值最大时，其对应的ABA浓度为适宜浓度，对应的培养时间是适宜培养时间。