基因工程中pIJ702是一种常用质粒(图1).其中tsr为硫链丝菌素抗性基因.mel是黑色素合成基因.其表达能使白色的链霉菌菌落变成黑色菌落,而限制酶CLaⅠ.BglⅡ.PstⅠ.SacⅠ.SphⅠ在pIJ702上分别只有一处识别序列．pIJ702pZHZ8BglⅡ5.7kb6.7kbClaⅠ5.7kb2.2kb.4.5kbPstⅠ5.7kb1.6kb.5.1kb(1)．以SacⅠ和SphⅠ切� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

基因工程中pIJ702是一种常用质粒（图1），其中tsr为硫链丝菌素（一种抗生素）抗性基因，mel是黑色素合成基因，其表达能使白色的链霉菌菌落变成黑色菌落；而限制酶CLaⅠ、BglⅡ、PstⅠ、SacⅠ、SphⅠ在pIJ702上分别只有一处识别序列．

	pIJ702	pZHZ8
BglⅡ	5.7kb	6.7kb
ClaⅠ	5.7kb	2.2kb，4.5kb
PstⅠ	5.7kb	1.6kb，5.1kb

（1）．以SacⅠ和SphⅠ切取的目的基因置换pIJ702上0.4kb（1kb=1000对碱基）的SacⅠ/SphⅠ片段，构成重组质粒pZHZ8．上述两种质粒的限制酶酶切片段长度列在表4中．由此判断目的基因的片段有

kb，以上的操作还需要的一种工具酶是

．
（2）重组质粒pZHZ8上的标记基因是

，含有重组质粒pZHZ8的菌落呈

色．
（3）若要检测重组质粒pZHZ8上的目的基因，可以用

作探针进行杂交．

考点：基因工程的原理及技术

专题：

分析：根据题意和图示分析可知：图示为pIJ702质粒的结构示意图，质粒是双链环状DNA分子．图表表示两种质粒的限制酶酶切片段长度．

解答： 解：（1）由于用BglⅡ等酶切割后，pIJ702长度为5.7kb，而pZHZ8长度都为6.7kb，增加了1kb；而目的基因置换pIJ702上0.4kb的SacⅠ/SphⅠ片段，所以目的基因的片段有1.4kb．形成重组质粒需要DNA连接酶将目的基因和质粒连接起来．
（2）重组质粒pZHZ8上的标记基因是tsr基因，mel是黑色素合成基因，其表达能使白色的链霉菌菌落变成黑色菌落，由于mel基因部分被替换后，链霉菌菌落不能变黑，而成为白色．
（3）若要检测重组质粒pZHZ8上的目的基因，可以用放射性同位素标记的目的基因作探针进行杂交．
故答案为：
（1）1.4 DNA连接酶
（2）tsr基因白
（3）放射性同位素标记的目的基因

点评：本题结合图表，考查基因工程、遗传信息转录和翻译，要求考生识记基因工程的原理、工具及操作步骤，能根据图表中的信息答题，属于考纲理解和应用层次的考查．

练习册系列答案

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