[题目]人乳铁蛋白是乳汁中一种重要的非血红素铁结合糖蛋白.主要由乳腺上皮细胞表达和分泌.它不仅参与铁的转运.而且具有广谱抗菌.抗氧化.抗癌.调节免疫系统等强大生物功能.被认为是一种新型抗菌.抗癌药物和极具开发潜力的食品和饲料添加剂.下图表示用乳腺生物反应器生产人乳铁蛋白的过程.请据图回答:(1)在构建重组质粒时.为防止目的基因和� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

【题目】人乳铁蛋白是乳汁中一种重要的非血红素铁结合糖蛋白，主要由乳腺上皮细胞表达和分泌。它不仅参与铁的转运，而且具有广谱抗菌、抗氧化、抗癌、调节免疫系统等强大生物功能，被认为是一种新型抗菌、抗癌药物和极具开发潜力的食品和饲料添加剂。下图表示用乳腺生物反应器生产人乳铁蛋白的过程，请据图回答：

（1）在构建重组质粒时，为防止目的基因和运载体自身环化，应先用_____限制性核酸内切酶处理人乳铁蛋白基因和运载体，然后用 ___________ 酶处理得到重组质粒。

（2）在进行①操作过程中，为了获得更多的卵子，应对良种母奶牛进行_____处理，从公牛中获得的精子需要经过________________ 培养才能与卵细胞结合。

（3）过程③常用________________方法将重组质粒导入到受精卵中。图中采用的生物工程技术④和⑥分别是 _____和 _____，后者在操作前通常取囊胚期的_____细胞进行性别鉴定。

（4）对代孕母牛要进行_____处理，使之与供体的生理状况保持相同，转基因奶牛成功的标志是_____。

【答案】SmaⅠ和PstⅠ DNA连接酶超数排卵获能显微注射法（早期）胚胎体外培养胚胎移植滋养层细胞同期发情处理转基因母牛的乳汁中含有人乳铁蛋白

【解析】

题图表示用乳腺生物反应器生产人乳铁蛋白的过程，包括了基因工程技术、体外受精技术、早期胚胎培养及胚胎移植技术，其中①表示卵母细胞的采集与培养，②表示精子的获取与获能，③表示将目的基因导入受体细胞，④早期胚胎培养，⑤早期胚胎（囊胚或桑葚胚），⑥指胚胎移植。

（1）在构建重组质粒时，为防止目的基因和运载体自身环化，应使目的基因两端露出的黏性末端不同，AluⅠ在目的基因里面，会破坏目的基因，故应选用SmaⅠ和PstⅠ限制性核酸内切酶处理人乳铁蛋白基因和运载体，然后用DNA连接酶处理得到重组质粒。

（2）为了获得更多的卵子，应对良种母奶牛进行促性腺激素处理，使其超数排卵，从公牛中获得的精子需要经过获能培养才能与卵细胞结合。

（3）将重组质粒导入到受精卵中常用的方法是显微注射法。图中采用的生物工程技术④是早期胚胎培养，⑥是胚胎移植，胚胎移植前通常取囊胚期的滋养层细胞进行性别鉴定。

（4）为使代孕母牛与供体的生理状况保持相同，应对代孕母牛进行同期发情处理，转基因奶牛成功的标志是转基因母牛的乳汁中含有人乳铁蛋白。

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