Question

7．科学家发现家蝇体内存在一种抗肿瘤蛋白（且具有抗菌能力）．这种蛋白质具有极强的抗菌能力，受到研究者重视．若临床使用发现此蛋白质对肿瘤确良好的疗效，可以通过基因工程技术导入大肠杆菌内进行大量生产．其过程大体如图1：

（1）在基因工程中，获取目的基因的方法有人工合成、PCR扩增．
（2）酶切此家蝇DNA分子和酶切质粒时，所用的限制酶可以不同，但是产生的粘性末端要满足粘性末端能完全互补条件．
（3）将抗肿瘤基因导入大肠杆菌，并在大肠杆菌细胞内成功表达产生了抗肿瘤蛋白，由于繁殖快、产量较高，因此在短时间内就能获得大量的抗肿瘤蛋白．
（4）细胞工程也可以将抗肿瘤蛋白临床使用，下面是单克隆抗体制备过程示意图，请据图2回答：
①图中A过程从小鼠的脾脏中取得的“小鼠细胞”是B淋巴（浆）细胞，要获得能产生抗肿瘤蛋白抗体的杂交瘤细胞至少要经过2次筛选．从小鼠体内提取分离该细胞之前，给小鼠注射的特定的物质是（特异性）抗原．
②图中B过程是细胞融合，该过程需要用灭活的病毒（或仙台病毒）、聚乙二醇或电激等诱导．

Answer 1

分析 单克隆抗体的制备是将骨髓瘤细胞与浆细胞结合，经过选择培养基的筛选得到杂交瘤细胞并经专一抗体检测后，培养能产生特定抗体的杂交瘤细胞即可得单克隆抗体，涉及动物细胞培养和动物细胞融合技术；杂交瘤细胞集合了两个细胞的遗传物质，但不一定全部表达；单克隆抗体最广泛的用途是用作体外诊断试剂，具有准确、快速等优点．

解答 解：（1）在基因工程中，获取目的基因的方法有从基因文库中获取目的基因、PCR扩增目的基因、人工合成目的基因．
（2）基因表达载体的构建过程，需要DNA连接酶将目的基因与运载体连接起来，所以两者需要相同的黏性末端且能完全互补．
（3）选用大肠杆菌作为受体细胞，原因是：繁殖速度快，可以在短时间内获得要表达的蛋白质．
（4）①单克隆抗体的制备过程中，采用的是已免疫的小鼠B细胞（浆细胞或效应B细胞），即经过注射特异性抗原，然后和骨髓瘤细胞的融合，需要经过至少两次筛选（第一次筛选获得杂交瘤细胞，第二次筛选获得能产生抗体的杂交瘤细胞），最终筛选出来的杂交瘤细胞．
②图中B过程是细胞融合，该过程需要用灭活的病毒（或仙台病毒）、聚乙二醇或电激等诱导．
故答案为：
（1）人工合成   PCR扩增          
（2）粘性末端能完全互补
（3）繁殖快、产量较高
（4）①B淋巴（浆）   2     （特异性）抗原 ②病毒（或仙台病毒）

点评 本题结合图解，考查基因工程和细胞工程的相关知识，要求考生识记基因工程的操作步骤，掌握各步骤中需要注意的细节；识记单克隆抗体的制备过程，能结合图解准确答题．