Question

【题目】某研究者分别给3只同种小鼠（X、Y和Z）接种抗原（A）引发免疫反应，每只小鼠接种5次，每次接种一周后测定各小鼠血清抗体的效价（能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数），结果如图所示．

若要制备杂交瘤细胞，需取发生免疫反应后小鼠的B淋巴细胞（染色体数目40条），并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞（染色体数目60条）按一定比例加入试管中，再加入聚乙二醇诱导细胞融合，经筛选培养及抗体检测，得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞．

回答下列问题：

（1）制备融合所需的B淋巴细胞时，所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16000以上，则小鼠最少需要经过__次免疫后才能符合要求．达到要求后的X、Y、Z这3只免疫小鼠中，最适合用于制备B淋巴细胞的小鼠是__，理由是__．

（2）杂交瘤细胞中有__个细胞核，染色体数目最多时为__条．

（3）由杂交瘤细胞产生的抗体与普通血清抗体相比较，具有__、__的特点．

（4）与植物细胞、微生物细胞相比，体外培养杂交瘤细胞对环境条件的要求比较高．培养液中除了含无机盐、葡萄糖、氨基酸等营养成分，还需添加__．此外，需保证适宜的__、稳定的pH和渗透压，培养液中的__水平会直接影响细胞的生长和代谢．

Answer 1

【答案】四 Y Y小鼠的抗体效价最高 1 200 特异性强 纯度高 动物血清 温度 溶解氧

【解析】

用抗原（A）分别免疫3只同种小鼠（X、Y和Z），每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价，由图可知，随着免疫次数的增加，血清抗体效价逐渐升高。在第四次免疫过程中出现了Y血清抗体均达到16000以上；在第五次免疫中，Y的效价最大，最适合用于制备B淋巴细胞；B细胞与骨髓瘤细胞形成的杂交细胞有三种：B淋巴细胞自身融合的细胞，骨髓瘤细胞自身融合的细胞和杂交瘤细胞。融合形成的杂交瘤细胞，具有2个亲本的染色体，故染色体为100条。

（1）据图分析，第四次注射后X、Y、Z小鼠的血清抗体效价均达到16000以上，小鼠Y的B淋巴细胞产生抗体效价最高，最适用于制备单克隆抗体。

（2）杂交瘤细胞形成后，由于核膜具有流动性，故小鼠的免疫B淋巴细胞核与其骨骼瘤细胞核会融合形成一个杂交的细胞核。小鼠的B淋巴细胞（染色体数目40条）和骨髓瘤细胞（染色体数目60条）融合后，染色体可达100条，在有丝分裂后期染色体数目临时加倍为200条。

（3）由杂交瘤细胞产生的抗体与普通血清抗体相比较，具有特异性强、纯度高的特点。

（4）动物细胞的体外培养对环境条件有比较高的要求，如无菌、无毒的环境；营养物质要充沛，还需加入血清、血浆等天然物质；同时需要适宜的温度和PH；95%空气和5%CO2气体环境等。