Question

10．有关微生物平板划线操作正确的是（　　）

• A． 平板划线数次后，在固体培养基上都可以形成由一个细菌繁殖而来的肉眼可见的菌落
• B． 打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后无需通过火焰，马上塞上棉塞即可
• C． 将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可
• D． 在第二次划线操作时，总是从上一次划线的末端开始划线

Answer 1

分析 平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面．其操作步骤是：
①将接种环在酒精灯火焰上灼烧直至烧红．
②在酒精灯火焰旁冷却接种环，并打开大肠杆菌的菌种试管的棉塞．
③将菌种试管口通过火焰达到消灭试管口杂菌的目的．
④将冷却的接种环伸入到菌液中取出一环菌种．
⑤将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞．
⑥将皿盖打开一条缝隙，把接种环伸入平板内划3～5条平行线，盖上皿盖，不要划破培养基．
⑦灼烧接种环，冷却后从第一区划线末端开始向第二区域内划线．重复上述过程，完成三、四、五区域内划线．注意不要将第五区的划线与第一区划线相连．
⑧将平板倒置放在培养箱中培养．

解答 解：A、平板划线数次后，如果菌液的稀释度不够，在固体培养基上不一定能够形成由一个细菌繁殖而来的肉眼可见的菌落，A错误；
B、打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需再次通过火焰，塞上棉塞即可，B错误；
C、将沾有菌种的接种环迅速伸人平板内，划三至五条平行线，灼烧接种环，冷却后从第一区划线末端开始向第二区域内划线．重复上述过程，完成三、四、五区域内划线．注意不要将第五区的划线与第一区划线相连，C错误；
D、在第二次划线操作时，总是从上一次划线的末端开始划线，D正确．
故选：D．

点评 本题主要考查破保护性操作的步骤，意在强化学生对平板划线法操作的过程的识记、理解与运用，提高实验技能．