【题目】科研人员通过基因工程实现了β-甘露聚糖酶基因在猪肠道野生酵母菌中的表达，使原来不能被猪利用的粗纤维在猪肠道内被分解成可直接吸收的单糖。下图为构建工程菌的部分过程，其中介导序列能引导载体整合到酵母菌的染色体DNA上。请据图回答：
(1)①过程中需要的工具酶是___________，其最适温度的范围一般是___________(a.55~60℃，b.70~75℃，c.90~95℃)。②③过程中的工具酶作用的化学键是___________。
(2)①过程从野生酵母菌染色体DNA中PCR扩增介导序列时，科研人员设计了如下一对引物：
和
，其中下划线部分序列的设计依据是___________，方框部分序列的设计目的是___________。
(3)若 Bamh I酶切的DNA末端与BglⅡ酶切的DNA末端可以被DNA连接酶连接，原因是___________，连接的部位，这两种酶___________(填“都能”、“都不能”或“只有一种能”)切开，原因是___________。
(4)若使用EcoRⅠ和Sal I酶对重组表达载体进行完全酶切并鉴定，可得到___________种DNA片段。
【答案】热稳定性DNA聚合酶（Taq酶或耐高温的DNA聚合酶） （70~75℃） 磷酸二酯键 介导序列两端的部分DNA序列 使扩增出的介导序列两端含有限制酶EcoR I和BamH I的识别序列（便于构建重组质粒） 黏性末端序列互补或粘性末端相同 不能 连接部位不再是BamH I酶与BglⅡ酶的识别序列 3
【解析】
分析题图为将β-甘露聚糖酶基因整合到酵母细胞的基因的过程：图示为构建工程菌的部分过程，其中①表示采用PCR技术扩增介导序列的过程；②是用DNA连接酶将质粒载体与介导序列连接形成重组质粒的过程；③表示用DNA连接酶将质粒载体、介导序列质粒载体和克隆载体重新组成形成重组表达载体。
（1）图中①表示采用PCR技术扩增介导序列的过程，该过程在高温条件下进行，需要热稳定性DNA聚合酶（Taq酶或耐高温的DNA聚合酶），其最适温度的范围一般是70~75℃；②③表示基因表达载体的构建过程，除了图中的限制酶外，该过程中还需要DNA连接酶，作用的化学键是磷酸二酯键。
（2）下划线部分序列的设计根据是介导序列两端的部分DNA序列；GAATTC是限制酶EcoRⅠ的识别序列，而CCTAGG是限制酶BamHⅠ的识别序列，因此方框部分序列的设计目的是使扩增出的介导序列两端含有限制酶EcoRⅠ和BamHⅠ的识别序列， （便于构建重组质粒）。
（3）若 Bamh I酶切的DNA末端与BglⅡ酶切的DNA末端可以被DNA连接酶连接，说明黏性末端序列互补或粘性末端相同，连接的部位这两种酶都不能切开，原因是连接部位不再是BamH I酶与BglⅡ酶的识别序列。
（4）由图可以知道，重组的基因表达载体含有2个EcoRⅠ酶割位点，含有1个SalⅠ酶切位点，因此使用EcoRⅠ和SalⅠ酶切重组质粒可以得到3种DNA片断。
小学学习好帮手系列答案
小学同步三练核心密卷系列答案科目：高中生物 来源： 题型：
【题目】下列关于酶的叙述，正确的是（ ）
①酶是活细胞产生的 ②酶的化学本质都是蛋白质
③酶具有专一性、高效性 ④酶促反应与外界条件无关
A.①②B.②③C.③④D.①③
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【题目】植物细胞光合作用与细胞呼吸之间有密切的联系。下图表示了两者之间的关系，请根据图示分析回答：
（1） 过程①中 A 物质是_____，过程②中C 物质是_____。
（2） 如果用同位素3 H 标记参加光合作用的水，则同位素3 H 在上图光合作用过程中最可能的转移途径是_____。
（3） ⑤过程发生的具体场所是_____。
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【题目】科学家在研究线粒体膜的功能时，先去除外膜，再用超声波破坏线粒体内膜，破裂的内膜自动闭合成小泡，然后用尿素处理这些小泡，实验流程如下图所示。请据图回答：
(1)“内共生学说”认为线粒体是好氧细菌被原始真核生物吞噬后，经长期的共生而形成的，依据此学说，可推测线粒体的外膜与原始真核生物的___________(细胞结构)在化学组成上相似，主要成分都是___________。
(2)为研究线粒体内膜的具体功能，科研人员利用___________的原理，使线粒体的外膜先吸水涨破，经___________(实验技术)后将外膜与线粒体内膜包裹的基质分开。
(3)研究人员发现线粒体内膜上的F0－F1颗粒物既是一种___________，也是ATP合成酶，其中___________是疏水的。为了研究F0－F1颗粒物的结构与合成ATP的关系，研究人员用尿素破坏内膜小泡将F1颗粒与小泡分开，检测处理前后ATP的合成。若处理之前，在跨膜H+浓度梯度条件下，含F0－F1颗粒内膜小泡能合成ATP；处理后___________，说明F1颗粒的功能与催化ATP的合成有关。
(4)线粒体基质中可能含有的化学成分有___________(填字母)。
a.水 b.丙酮酸 c.葡萄糖 d.ATP e.核苷酸 f.氨基酸
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【题目】某有机物的结构简式如图，下列关于该有机物的叙述不正确的是
A.该有机物能使Br2的CCl4溶液褪色，但不能使酸性KMnO4溶液褪色
B.1mol该物质与H2发生加成反应，最多可消耗H2 4mol
C.在一定条件下，能发生取代、加成、氧化、酯化和加聚反应
D.能发生酯化反应的有两个官能团
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【题目】某有机物A(C8H16O2)能发生如图所示的变化，其中C与F是同分异构体。则下列说法不正确的是(A、B、C、D、E、F均为有机物) ( )
A.D到F两步氧化的条件不同
B.符合上述转化关系的有机物A的结构有4种
C.1 mol D完全转化为E转移2 mol电子
D.B到C发生复分解反应
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【题目】苜蓿夜蛾是番茄的主要害虫之一。某实验室将抗虫基因转入番茄，培育出抗虫番茄。下图是获得转基因番茄的技术流程[注：卡那霉素抗性基因（kanR）作为标记基因，番茄叶片对卡那霉素高度敏感]，请据图回答：
（1）构建重组质粒的过程中需要用到的工具酶为__________和DNA连接酶；DNA连接酶根据来源分为两类：T4DNA连接酶和E·coli DNA连接酶。这两种酶作用有所差别：__________只能连接双链DNA的黏性末端，而__________既可以连接双链DNA的黏性末端，又可以“缝合”双链DNA的齐平末端。
（2）土壤农杆菌的感染特点是能在自然条件下感染__________植物和裸子植物，而对大多数__________植物没有感染能力。
（3）将重组质粒导入土壤农杆菌的目的是利用农杆菌能够感染番茄细胞，并将__________转移至受体细胞的特点，使目的基因进入受体细胞中，并插入到番茄细胞的__________上，最终形成转基因植株。
（4）将经过__________形成的愈伤组织转移到添加一定浓度植物激素和__________的培养基中，在适宜条件下进行培养，筛选出转基因番茄。
（5）用PCR方法检测转基因番茄是否含有目的基因时，需根据________________的核苷酸序列设计特异引物，以____________________为模板进行第一轮扩增。
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科目：高中生物 来源： 题型：
【题目】现代人的生活节奏快，压力大。如图（a）为下丘脑的部分功能的示意图，图（b）为压力对人体部分器官的影响。分析图形，回答下列问题：
（1）若已知图（a）中的突触前膜释放的是兴奋性递质，则在a处给予适宜的刺激，b处电流计会发生___________次偏转。分析图（b）可知，人体因为情绪产生压力的调节属于____________调节；若肝脏细胞的细胞膜上存在激素a的特异性受体，激素a分泌量上升能使血糖浓度升高，由此推断激素a能促进____________水解为葡萄糖。
（2）下丘脑对激素e分泌的调节与对甲状腺激素分泌的调节类似，由此推断图（b）中缺少____________（描述出起点和终点）箭头，图（b）中的（二）应填____________（填“长”或“短”）。
（3）研究发现，在压力长期得不到缓解的情况下，人体免疫力会有所下降，可能的原因是激素e能抑制T细胞中____________的合成和释放，从而使B细胞的____________受阻。
（4）图中各器官细胞中的mRNA，可以与生长激素基因形成杂交分子的是____________。
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