【题目】苯丙酮尿症是由于患者PKU基因突变引起体细胞中缺少一种酶，致使体内的苯丙氨酸代谢异常转化为苯丙酮酸，从而导致患者神经系统损害。将正常PKU基因定点整合到PKU基因突变的小鼠胚胎干细胞的染色体DNA上来替换突变基因，可用来研究该病的基因治疗过程。定点整合的过程是：从染色体DNA上突变PKU基因两侧各选择一段DNA序列HB1和HB2，根据其碱基序列分别合成HB1和HB2，再将两者分别与基因K1、K2连接，中间插入正常PKU基因和标记基因neor，构建出如图所示的重组载体。重组载体和染色体DNA中的HB1和HB2序列发生交换，导致两者之间区域发生互换，如图所示。回答下列问题：
（1）上图中通过基因定点整合可替换特定基因，该技术可用于单基因遗传病的治疗，该技术的应用原理属于________。该实验用小鼠胚胎干细胞作为PKU基因的受体细胞以培育出转基因小鼠，除了胚胎干细胞能大量增殖外，还因为胚胎干细胞________。
（2）实验中小鼠胚胎发育到囊胚期时，聚集在胚胎一端，个体较大的细胞是______________，可将其取出并分散成单个细胞进行培养，将来可为实验提供所需的胚胎干细胞。培养过程中培养液除了一些无机盐和有机盐外，还需要添加“两酸、两素”以及动物血清，其中的“两酸”是指________，培养过程中大部分细胞会贴附在培养瓶的表面生长，当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为________。
（3）用图中重组载体转化胚胎干细胞时，会出现PKU基因错误整合。错误整合时，载体的两个K基因中至少会有一个与neor一起整合到染色体DNA上。已知含有neor的细胞具有G418的抗性。 K1、K2的产物都能把DHPG转化成有毒物质而使细胞死亡。转化后的胚胎干细胞依次在含有G418及同时含有G418和DHPG的培养液中进行培养，在双重选择下存活下来的是________的胚胎干细胞，理由是____________________________。
（4） 将筛选得到的胚胎干细胞培育成小鼠，从个体生物学水平检测，若小鼠尿液中________，说明PKU基因成功表达。
【答案】基因重组 具有发育的全能性（全能性） 内细胞团 氨基酸和核苷酸 细胞的接触抑制（接触抑制） 正确整合（含neor而不含K基因）（含neor而不含K1或K2基因） 能在含有G418的培养液存活说明转化后的胚胎干细胞中含neor，能在含DHPG的培养液中存活说明转化后的胚胎干细胞中不含K基因 不含大量苯丙酮酸（苯丙酮酸含量在正常范围内）
【解析】
DNA重组技术至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体。构建重组载体时，首先需用限制性核酸内切酶切割目的基因和运载体，再用DNA连接酶连接目的基因和运载体形成重组载体。胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的内细胞团），因此获取的胚胎干细胞应取自囊胚的内细胞团。结合题图可知，互换后的小鼠染色体DNA，与小鼠染色体DNA比较，HB1和HB2的碱基分别替换成了重组载体的HB1′和HB2′，并且增加了重组载体的neor为新霉素抗性基因，原来突变的PKU基因，替换成了正常的PKU基因。
（1）利用基因工程技术将基因定点整合可替换特定基因，利用的原理是基因重组。胚胎干细胞具有发育的全能性，且能大量增殖，常被用作受体细胞。
（2）当胚胎发育到囊胚时期时，聚集在胚胎一端，个体较大的细胞是内细胞团，将来可发育成胚胎的各种组织。胚胎培养液中除了一些无机盐和有机盐外，还需要添加“两酸、两素”以及动物血清，其中的“两酸”是指氨基酸和核苷酸。动物细胞培养过程会出现贴壁生长，出现接触抑制现象。
（3）由题意可知，转化后的各类胚胎干细胞要依次在含有G418和同时含有G418和DHPG的培养液中培养，在双重选择下存活并增值的是正确整合的胚胎干细胞，原因是能在含有G418的培养液存活说明转化后的胚胎干细胞中含neor，能在同时含G418和DHPG的培养液中存活说明转化后的胚胎干细胞中含neor且不含HSV-tk。
（4）苯丙酮尿症患者体内缺乏一种酶，导致体内苯丙氨酸不能转化为酪氨酸，而大量转化为苯丙酮酸，在体内积累，随尿液排出，若转基因小鼠的尿液中不含大量苯丙酮酸，说明PKU基因正常表达。
金牌教辅培优优选卷期末冲刺100分系列答案科目：高中生物 来源： 题型：
【题目】下图中实线表示某地的一种鸟类当年的种群数量（Nt）和一年后的种群数量（Nt+1）间的关系，虚线P表示Nt+1=Nt。下列有关叙述错误的是（ ）
A.鸟类的领域行为不会改变该种群的环境容纳量
B.与A点相比，B点的增长速率更大
C.不管种群数量小于或大于C，最后都能稳定在C值附近
D.种群数量在B点时的年龄结构可能为增长型
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【题目】图甲是缩手反射相关结构，图乙是图甲中某一结构的亚显微结构模式图，图丙表示三个神经元及其联系，据图回答：
（1）甲图中f表示的结构是 ______，乙图是甲图中 ______（填字母）的亚显微结构放大模式图。 乙图中的B可能是下一个神经元的胞体膜或_________膜、______膜 。
（2）图丙中若①代表小腿上的感受器，⑤代表神经支配的小腿肌肉，则③称为______。若刺激图丙中b点，图中除b点外______（字母）点可产生兴奋．
（3）图乙中神经递质由A细胞合成、包装加工，形成突触小泡，突触小泡再与突触前膜融合所涉及的细胞器主要有 ______、______。
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【题目】某同学用黑藻观察“植物细胞的质壁分离”实验中，在盖玻片一侧滴入加有伊红（植物细胞不吸收的红色染料）的 0.3g/ml 的蔗糖溶液，另一侧用吸水纸吸引。重复多次，在显微镜下观察，结果如图。下列叙述正确的是
A. ①所指暗线为细胞壁，不具有伸缩性
B. ②所指暗区是绿色大液泡，体积变小
C. ③所指亮区是细胞溶胶，充满红色的溶液
D. ③区域变大时，细胞吸水能力逐渐增强
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【题目】下图表示叶肉细胞内某种膜上发生的部分生理过程。 回答下列问题：
（1）该膜的名称是_______，主要成分为________，其功能特点是_______。
（2）图中ATP 形成时伴随________的产生。H+通过b蛋白的运输方式是_________。
（3）从图中可知b蛋白具有________功能。
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【题目】下图表示细胞内的能量释放、转移和利用的过程。下列有关分析不合理的是（ ）
A.a过程中必定有[H]的产生和消耗
B.通过a过程，能源物质中的能量大多数可能是以乙的形式散失的
C.放能反应一般与图中b代表的反应相联系
D.图中c代表的反应主要发生在线粒体中
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【题目】下图甲为小麦叶肉细胞部分代谢过程示意图，其中M、N、K表示叶肉细胞中三种很重要的细胞器，K中含有多种营养物质，可以调节细胞内的环境；图乙表示该植物叶片CO2吸收量随光照强度的变化曲线。请根据图中所给信息回答下列问题：
（1）图甲中含有色素的细胞器是_____________，其中进入N中的三碳化合物是_____________。
（2）当光照强度为图乙中的B时，此时叶肉细胞不能进行的过程是______(用图甲中的字母表示)。
（3）图乙中光照强度为O～D时此植物细胞呼吸消耗的有机物量为________________(用S1、S2、S3表示)，光合作用有机物的净积累量为_________________(用S1、S2、S3表示)。
（4）M在氧化过程中产生的[H]将与氧气结合形成水。2，4-二硝基苯酚(DNP)对该氧化过程没有影响，但其能使该过程所释放的能量都以热能的形式散失。若将DNP注入细胞中，M的氧化分解____(填“能”或“不能”)继续进行。
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【题目】一般情况下，一定浓度的抗生素会杀死细菌，但变异的细菌可能产生耐药性。在实验室连续培养细菌时，如果向培养基中添加抗生素，耐药菌有可能存活下来。某研究小组欲通过观察细菌在含有抗生素的培养基上的生长状况，探究卡那霉素对大肠杆菌的选择作用，实验步骤如下：
①制作经______法灭菌的牛肉膏蛋白胨液体培养基及固体培养基平板；
②用记号笔在平板的______（填“皿盖”或“皿底”）画两条相互垂直的直线，将平板分为4个区域，分别标号为a、b、c、d；
③取少量的大肠杆菌的培养液，用无菌的______将其均匀地涂抹在培养基平板上；
④设置a号区域为对照组，其余区域为实验组，进行相关操作；
⑤将平板______（填“正放”或“倒置”）于37℃的恒温箱中培养12～16小时；
⑥观察培养基上大肠杆菌的生长状况，看滤纸片附近是否出现了抑菌圈。如果有（如图示），从抑菌圈边缘的菌落上挑取细菌，接种到已灭菌的液体培养基中培养，然后重复步骤③～⑤。如此重复几代，记录每一代培养物中实验组抑菌圈直径的平均值。
问答下列问题。
（1）将以上实验步骤补充完整：①________②________③________⑤________。
（2）步骡④中，实验组的操作是________。
（3）在连续培养几代后，抑菌圈的平均直径________（填“不变”、“变小”或“变大”），原因是________。
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【题目】膜蛋白是细胞内各类单位膜的基本成分，是各类膜结构执行功能的物质基础。如图表示脂双层上分布有三种膜蛋白。下列有关叙述错误的是
A.若蛋白A是转运蛋白，则该蛋白参与物质转运过程中必然发生形变
B.若蛋白 B 与细胞通讯有关，则该蛋白的合成一定经过内质网的加工
C.若蛋白 C 是主要组织相容性复合体，则同种生物质膜上蛋白C 一定相同
D.若蛋白 B 是 ATP 合成酶，则上述膜可能是类囊体膜
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