Question

下列是有关基因工程和细胞工程的问题，请据图分析回答．

科学家通过基因工程，成功培育出能抗棉铃虫的棉花植株--抗虫棉，其过程大致如图所示．
（1）基因工程的核心步骤是

 

．其目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，可遗传给下一代 并能够

 

 和发挥作用．获得cDNA片段的方法是

 

．
（2）上述过程中，将目的基因导入棉花细胞内使用了

 

法，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的

 

中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的

 

上．这种导入方法首先必须用

 

处理土壤农杆菌，使土壤农杆菌转变为

 

态细胞；然后将

 

在缓冲液中混合培养完成转化过程． 目的基因在棉株体内能否成功转录，从分子水平上检测可采用的方法是

 

，其中用

 

作为探针． 如果把该基因导入叶绿体DNA中，将来产生的配子中

 

（填“一定”或“不一定”）含有抗病基因．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术

专题：

分析：基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取，②基因表达载体的构建，③将目的基因导入受体细胞，④目的基因的检测与鉴定．
其中核心步骤为基因表达载体的构建；其目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用．
农杆菌转化法：
①农杆菌特点：易感染双子叶植物和裸子植物，对单子叶植物没有感染力；Ti质粒的T-DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体上．
②转化：目的基因插人Ti质粒的T-DNA上

进入

农杆菌→导入植物细胞→目的基因整合到植物细胞染色体上→目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达．

解答： 解：（1）基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建．其目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，可遗传给下一代并能够表达 和发挥作用．获得cDNA片段的方法是利用mRNA作为模板进行反转录．
（2）将目的基因导入棉花细胞内使用了农杆菌转化法，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的T-DNA中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的染色体上．这种导入方法首先必须用Ca²⁺处理土壤农杆菌，使土壤农杆菌转变为感受态态细胞；然后将农杆菌和重组基因表达载体在缓冲液中混合培养完成转化过程． 目的基因在棉株体内能否成功转录，从分子水平上检测可采用的方法是分子杂交，其中用标记的目的基因作为探针．由于在产生配子的过程中，细胞质基因是随机分配的，因此产生的配子中不一定含有抗病基因．
故答案为：
（1）基因表达载体的构建   表达   反转录
（2）农杆菌转化    T-DNA   染色体   Ca²⁺感受态   农杆菌和重组基因表达载体   分子杂交    标记的目的基因   不一定

点评：本题考查了基因工程的相关知识，考生要能够识记基因工程的操作步骤，明确其中的核心步骤以及目的；识记并掌握农杆菌转化法的过程；掌握目的基因检测的方法；明确在减数分裂过程中细胞质基因是随机分配的．