Question

某生物学兴趣小组为调查一牛奶制品是否过期，进行了微生物培养实验，请回答下列有关问题：

（1）在微生物培养中，对培养基常用

 

的方法进行灭菌．
（2）微生物分离的方法最常用的是

 

和

 

．
（3）如果采用如图的方法，从第二次划线开始，接种环上的菌种直接来源于于

 

．
（4）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了细菌样液的平板置于

 

中培养，培养的温度应设定在37℃．要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种

 

作为对照进行实验．
（5）用平板计数法得到菌落数往往比活菌的实际数目低，原因是

 

．若0.1mL稀释度为10^-2的三个平板菌落分别为270、180、240，稀释度为10^-3的三个平板菌落分别为27、19、25，则100mL液体细菌总数计为

 

个，该牛奶制品已过期．

Answer 1

考点：微生物的分离和培养

专题：

分析：常用的微生物接种的方法有平板划线法和稀释涂布平板法；在用平板划线法接种时，第一步划线前，灼烧接种环是防止接种环上有其它微生物而污染培养基，以后每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次接种时留下的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来自上次划线的末端，以便通过多次划线后，得到单个的菌落；划线结束后仍要灼烧接种环，以免菌种对环境造成污染．

解答： 解：（1）培养基的灭菌用高压蒸汽灭菌法灭菌．
（2）微生物分离常用平板划线法和稀释涂布平板法．
（3）平板划线时，每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次接种时留下的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来自上次划线的末端，以便通过多次划线后，得到单个的菌落．
（4）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了细菌样液的平板置于恒温培养箱中培养，培养的温度设定在37℃．要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种无菌水 作为对照进行实验．
（5）当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，往往使观察到的菌落数比活菌数低．0.1mL稀释度为10^-2的三个平板菌落分别为270、180、240，平均数为230，所以100mL液体细菌总数计为

230×100

0.1×10-2

=2.3×10⁷．
故答案为：
（1）高压蒸汽灭菌
（2）平板划线法    稀释涂布平板法
（3）上次划线的末端
（4）恒温培养箱    无菌水
（5）当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落      2.3×10⁷

点评：本题考查微生物的培养，要求学生识记培养的灭菌方法，识记和理解微生物的分离方法．