Question

【题目】绿色荧光是由绿色荧光蛋白发出的,为培育能发出绿色荧光的小鼠,人们设计了如下的流程：

（1）获取绿色荧光蛋白基因的常用方法有从基因文库中获取和_____________________等。

（2）绿色荧光基因通常可以从基因文库中获取,含有一种生物一部分基因的文库称为_______________________。

（3）A过程是基因工程的核心,常用到的工具酶有限制性核酸内切酶和_______________________, 它们作用的化学键是_____________________。一个基因表达载体的组成，除了目的基因和复制原点外，还必需有__________________,__________________以及标记基因。

（4）B过程常用的方法是______________________。

（5）通常采用_________________________技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组

Answer 1

【答案】人工合成cDNA文库（部分基因文库）DNA连接酶磷酸二酯键启动子终止子显微注射技术DNA分子杂交技术

【解析】

分析题图：图表示培育绿色荧光小鼠的基本流程，其中A表示基因表达载体的构建过程，B表示将目的基因导入受体细胞，C表示早期胚胎培养，D表示胚胎移植，E表示妊娠。

（1）获取目的基因——绿色荧光蛋白基因的方法有从基因文库中获取和人工通过化学方法合成等。

（2）基因文库分为基因组文库和部分基因文库，其中含有一种生物所有基因的文库称为基因组文库，含有一种生物的部分基因的文库称为部分基因文库，如cDNA文库。

（3）A过程表示基因表达载体的构建，是基因工程的核心，常用到的工具酶有限制性核酸内切酶和DNA连接酶，它们作用的化学键是磷酸二酯键。基因表达载体的组成包括目的基因+启动子+终止子+标记基因，所以用于培育绿色荧光小鼠的基因表达载体的组成必须有启动子、终止子、目的基因和标记基因等部分。

（4）将目的基因导入动物细胞采用最多也最有效的方法是显微注射技术。

（5）检测外源基因是否插入了小鼠的基因组，通常采用DNA分子杂交技术，即用外源基因制作成的DNA探针与受体细胞的基因组进行杂交，观察是否出现杂交带。