Question

15．利用细菌大量生产人类胰岛素，下列叙述错误的是（　　）

• A． 用适当的酶对运载体与人类胰岛素基因进行切割与粘合
• B． 用适当的化学物质处理受体细菌表面，将重组 DNA 导入受体细菌
• C． 重组 DNA 必须能在受体细菌内进行复制与转录，并合成人类胰岛素
• D． 通常通过检测目的基因产物来检验重组 DNA 是否已导入受体细菌

Answer 1

分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，该步骤需要限制酶和DNA连接酶；基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：A、构建基因表达载体时，需要用同种限制酶对运载体与人类胰岛素基因进行切割，其次还需要用DNA连接酶对两者进行粘合，A正确；
B、将目的基因导入微生物细胞需要采用感受态转化法，即用适当的化学物质（氯化钙）处理受体细菌表面，使之成为感受态，这样便于重组DNA导入受体细菌，B正确；
C、重组 DNA 必须能在受体细菌内进行复制与转录，并合成人类胰岛素，C正确；
D、通常通过检测目的基因产物来检验重组 DNA 是否已表达，D错误．
故选：D．

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的概念、原理、操作工具及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确判断各选项．