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    18．将苏云金杆菌Bt蛋白的基因导入棉花细胞中，可获得抗棉铃虫的转基因棉，其过程如图所示（注：农杆菌中Ti质拉上只有T-DNA片段能转移到植物细胞中）．
    （1）过程①需用同种限制性核酸内切酶对含Bt基因的DNA和Ti质粒进行酶切．为将过程

    ②获得的含重组质粒的农杆菌筛选出来，应使用含有卡那霉素物质的选择性培养基．
    （2）过程③中将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养，目的是让T-DNA进入棉花细胞并将其插入到植物细胞中染色体的DNA上，使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达．
    （3）检验转基因棉的抗虫性状，在个体水平上常用的方法是投放棉铃虫．种植转基因抗虫棉能减少农药的使用，以减轻环境污染．
    （4）若过程④仅获得大量的根，则应在培养基中增加细胞分裂素浓度激素以获得芽；部分接种在无激素培养基上的芽也能长根，原因是顶芽端合成的生长素向基部运输，促进根的分化．

    分析 分析题图：图示为转基因抗虫棉的培育过程图，主要包括：①基因表达载体的构建；②将目的基因导入受体细胞（采用农杆菌转化法）；③将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养，并脱分化形成愈伤组织，④再分化，将离体棉花植株培育成抗虫棉还需采用植物组织培养技术．

    解答 解：（1）过程①为基因表达载体的构建，需要同种限制酶对含有Bt基因的DNA和Ti质粒进行酶切．图解中看出，质粒上的标记基因为卡那霉素抗性基因，因此为将过程②获得的含重组质粒的农杆菌筛选出来，应使用含卡那霉素的选择培养基．
    （2）过程③中将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养，目的是让T-DNA进入棉花细胞并将其插入到植物细胞中染色体的DNA上，使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达．
    （3）检验转基因棉的抗虫性状，常用方法是投放棉铃虫，若棉铃虫大量死亡，说明转基因成功．种植转基因抗虫棉能减少农药的使用，以减轻环境污染．
    （4）过程④中在培养基中增加细胞分裂素浓度可以获得大量的芽；同时芽顶端合成的生长素向基部运输，促进根的分化．
    故答案为：
    （1）限制性核酸内切　　卡那霉素 
    （2）T-DNA　染色体 
    （3）投放棉铃虫　　农药
    （4）细胞分裂素浓度　　顶芽端合成的生长素向基部运输，促进根的分化

    点评 本题结合抗虫棉的培育过程图，考查基因工程、植物组织培养、基因分离定律的实质及应用，要求考生识记基因工程的原理、工具、操作步骤和应用．

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