Question

19．小鼠基因靶向敲除技术是采用工程技术手段使小鼠体内的某一基因失去功能，以研究基因在生物个体发育和病理过程中的作用．例如现有基因型为BB的小鼠，要敲除基因B，可先用体外合成的突变基因b取代正常基因B，使BB细胞改变为Bb细胞，最终培育成为基因敲除小鼠bb．分析回答下列问题：
（1）“基因靶向敲除”技术采用了基因工程的技术手段．基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性．
（2）基因表达载体应包括启动子、目的基因、终止子、标记基因．目的基因导入受体细胞后，首先要检测转基因生物DNA上是否插入了目的基因，这是目的基因能否在受体细胞中稳定遗传的关键．
（3）为获得“基因靶向敲除”的小鼠个体，则应将同源目的基因导入小鼠的受精卵．此外还必须经过早期胚胎培养和胚胎移植等胚胎工程的技术手段，最终由受体母鼠生下来．
（4）按上述“基因靶向敲除”操作获得的多只雌雄小鼠都是杂合子，人们想在此基础上获得一个含纯合目的基因的个体．简要的方案是：让获得的杂合子雌雄小鼠交配，从后代中筛选出含目的基因的纯合小鼠．

Answer 1

分析 基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品．基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术．
基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定．

解答 解：（1）基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品．基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术．
（2）基因表达载体的构建组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因，使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用．目的基因导入受体细胞后，首先要检测转基因生物DNA上是否插入了目的基因，
（3）“基因靶向敲除”实质上属于转基因技术．为获得“基因靶向敲除”的小鼠个体，则应将同源目的基因导入小鼠的受精卵．此外还必须经过早期胚胎培养和胚胎移植等步骤，最终由受体母鼠生下来．
（4）按上述“基因靶向敲除”操作获得的小鼠其基因是杂合的，让杂合雌雄个体杂交，从后代中选出含纯合基因的个体．
故答案为：
（1）体外DNA重组
（2）目的基因    终止子    DNA上是否插入了目的基因
（3）受精卵  早期胚胎培养
（4）让获得的杂合子雌雄小鼠交配，从后代中筛选出含目的基因的纯合小鼠

点评 本题考查动物细胞培养、基因工程的相关知识，意在考查考生能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断能力．基因工程与细胞工程、胚胎工程等现代生物技术都有一定联系，复习时可以建立知识框架，帮助记忆和理解．