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【题目】人血清白蛋白(HSA)具有重要的医用价值。科研人员通过生物工程技术获得转HSA基因母牛,以便通过乳腺生物反应器生产HSA,其主要技术流程如下图所示。

回答下列问题:

(1)为了通过乳腺生物反应器生产出HSA,在构建基因表达载体时,HAS基因的首端应连接____

(2)如上图所示,将牛胎儿成纤维细胞核移入去核卵母细胞中,该技术称为___________技术:供核的牛胎儿成纤维细胞通常选用传代10代以内的细胞,其原因是____________________

(3)胚胎移植时,为使代孕母牛能处于适合的生理状态,需要用激素对其进行_________处理。

(4)SRY—PCR法性别鉴定的基本程序是:提取牛胎儿成纤维细胞的DNA,经PCR反应体系扩增SRY基因(Y染色体上特有的性别决定基因)片段,然后对扩增产物进行检测。

PCR反应体系中除含缓冲液、模板DNA、四种脱氧核苷酸、引物以外,还应含有_____,引物应选用下图中的_______(填图中标号)

注:是引物,箭头是延伸方向。

②若扩增产物含大量SRY基因片段,则该种牛胎儿成纤维细胞_________(不能”)用作技术流程中转化过程的受体细胞。

(5)从细胞水平鉴定早期胚胎性别的方法是分析细胞的___________组成。

【答案】乳腺蛋白基因的启动子 细胞核移植(体细胞核移植) 能保持正常的二倍体核型(能保持遗传物质不变) 同期发情 热稳定DNA聚合酶(Taq酶) Ⅰ和Ⅳ 不能 染色体

【解析】

构建基因表达载体时,首先需要用限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体,还需要用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子,基因表达载体的组成包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。据图分析,图示涉及到的技术有基因工程和核移植技术,先将HAS基因与质粒结合形成重组质粒,再将重组质粒导入牛胎儿成纤维细胞;接着将导入目的基因的成纤维细胞的细胞核取出,与去核卵母细胞重组形成重组细胞,培养成早期胚胎后移植到代孕母牛体内,最终获得了转基因母牛。

1)为了通过乳腺生物反应器生产出HSA,在构建基因表达载体时,HAS基因的首端应连接乳腺蛋白基因的启动子。

2)将牛胎儿成纤维细胞核移入去核卵母细胞中,该技术称为细胞核移植(体细胞核移植)技术;由于10代以内的细胞能保持正常的二倍体核型(能保持遗传物质不变),因此供核的牛胎儿成纤维细胞通常选用传代10代以内的细胞。

3)胚胎移植时,为了为使代孕母牛和供体母牛处于相同的生理状态,需要用激素对其进行同期发情处理。

4)①PCR反应的条件:模板DNAdNTP(包含dATPdCTPdGTPdTTP)、引物、热稳定DNA聚合酶。引物是一小段单链DNA,引物5′端的碱基可以与DNA两条链的3′端的碱基进行碱基互补配对,可作为DNA复制的起始点,DNA聚合酶从引物的3′端的开始延伸DNA链,因此要扩增SRY基因,应选用图中的Ⅰ和Ⅳ作为引物。

②只有母牛能产生乳汁,能作为生物反应器,因此若扩增产物含大量SPY基因片段,由于SRY基因是Y染色体上特有的性别决定基因片段,则该种牛胎儿为雄性,其成纤维细胞不能用作技术流程中转化过程的受体细胞。

5)从细胞水平鉴定早期胚胎性别的方法是分析细胞的染色体组成。

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(1)若①和②都是生物大分子,则①的合成场所是____,已知②的基本单位是葡萄糖,则②可能是____

(2)若③是生命活动的直接能源物质,则它的合成与____(吸能、放能)反应相联系。若④存在于叶肉细胞,则其功能是__________

(3)为检测韭菜根细胞中贮存的营养物质,同学们将根切成薄片进行实验。甲同学将薄片放在载玻片上,滴加少许苏丹Ⅳ染液染色3分钟后又滴加1~2滴体积分数50%酒精________,在显微镜下观察到细胞质中有红色脂肪滴;乙同学将韭菜根切成的薄片放在载玻片上,滴加少许新配制的斐林试剂,将载玻片在酒精灯上加热,直接观察颜色变化。乙同学的目的是检测根细胞中是否存在________,可通过___来判断细胞中是否存在该物质及含量的多少。

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D. 三个品种达到最大净光合速率时的温度没有显著差异

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C. ba两者的分泌物在某些生理效应上可表现为协同作用

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气孔限制值 Ls=1-胞间CO2浓度/空气中CO2浓度

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(2)通过分析处理7d的数据可知,空气湿度较低时,气孔导度_______,胞间CO2浓度较小,推测此时净光合作用速率较低的原因是:_______________________________________

(3)进一步研究不同湿度下的叶温发现,高湿度组叶温要显著低于低湿度组。处理 14d 时,高湿组相较于低湿组的胞间CO2浓度降低,气孔限制值增大。说明湿度增大,除了气孔导度增大,有利于相关气体的吸收以外,还增强了_______________,从而促进光合速率的提高。

(4)根据以上实验结果,在农业生产中可以通过_______________________来降低“光午休”现象。

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回答问题:

(1)图中物质A (“C3化合物“C5化合物”)

(2)CO2浓度为1%的环境中,物质B的浓度比A的低,原因是 ;

CO2浓度从1%迅速降低到0.003%,物质B浓度升高的原因是

(3)若使该植物继续处于CO2浓度为0.003%的环境中,暗反应中C3C5化合物浓度达到稳定时,物质A的浓度将比B (”)

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