Question

【题目】动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础，请回答下列有关动物细胞培养的问题：

（1）在培养瓶中进行动物细胞培养时，需两次用到胰蛋白酶，第一次使用的目的是将组织分散成单个细胞，此次的胰蛋白酶也可用____________酶代替。由于动物细胞培养具有____________、____________现象，因此需第二次用该酶处理，然后分瓶培养。在培养过程中，应定期更换培养液，目的是________________________。

（2）目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为____________代以内的细胞，以保持细胞正常的____________核型。

（3）在单克隆抗体制备过程中，将获得__________________________（答出两个特点）的杂交瘤细胞进行____________培养和抗体检测以后，再经过多次筛选，可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。利用灭活的病毒可以诱导产生杂交瘤细胞，其中的灭活是指____________________________________。

Answer 1

【答案】胶原蛋白??? 贴壁生长??? 接触抑制??? 清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害??? 10??? 二倍体??? 既能产生特异性抗体，又能无限增殖??? 克隆化??? 利用物理或化学手段使病毒失去感染能力，但是并不破坏这些病原体的抗原结构???

【解析】

动物细胞培养：

1、当贴壁细胞分裂生长到互相接触时，细胞就会停止分裂，此时需要将出现接触抑制的细胞重新使用胰蛋白酶处理；

2、单克隆抗体的制备：①制备产生特异性抗体的B淋巴细胞；②获得杂交瘤细胞；③克隆化培养和抗体检测；④将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖；⑤提取单克隆抗体。

（1）在培养瓶中进行动物细胞培养时，第一次使用胰蛋白酶的目的是将组织分散成单个细胞，此次的胰蛋白酶也可用胶原蛋白酶代替。由于正常动物细胞具有贴壁生长和接触抑制的特点，故培养到一定阶段需要第二次用胰蛋白酶处理，然后分瓶培养。在培养过程中，常要清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害，故需要定期更换培养液。

（2）目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内的细胞，以保持细胞正常的二倍体核型。

（3）在单克隆抗体制备过程中，将获得既能产生特异性抗体，又能无限增殖的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测以后，再经过多次筛选，可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞，将这些细胞在体外做大规模培养或注入小鼠腹腔内增殖，从细胞培养液和小鼠腹水中就可获得大量的单克隆抗体。灭活是指利用物理或化学手段使病毒失去感染能力，但是并不破坏这些病原体的抗原结构