下列关于基因工程的说法正确的是（ ）
A．限制性核酸内切酶能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的切割点上将相应碱基之间的键断开，从而使DNA分子切断
B．DNA连接酶、限制性内切酶及载体是构建重组质粒必需的工具酶
C．下面是两种限制性核酸内切酶所识别的DNA分子序列和剪切位点图（↓表示剪切点、切出的断面为黏性末端）：限制酶1：—↓GATC— ，限制酶2：—GGATC↓C— ，这两种限制酶剪出的黏性末端是不相同的
D．在人工合成目的基因的过程中，根据蛋白质中氨基酸序列合成的目的基因碱基序列及控制的性状与生物体内原有的基因及性状是相同的。
科目：高中生物 来源：上海市十三校2012届高三第二次联考生物试题 题型：071
回答下列关于基因工程的相关问题。
质粒是基因工程中的一种常用的工具之一，经修饰改造后的质粒如下图七一1所示。PUC118上的Lacz基因编码β半乳糖苷酶的一条多肽链，其表达产物与菌落颜色有关；经“修饰”后的“多克隆位点”位于LacZ基因之中。AmpR是抗氮卞青霉素基因。
1．PUC118上的基因AmpR作用的是：________“多克隆位点”中含有多种限制酶的识别序列，如HindⅢ，其切割后产生的DNA片断中含有的部分序列是
，则限制酶HindⅢ的识别序列是________。
2．图2示意将目的基因导入大肠杆菌的操作步骤。其中，I～V表示操作过程；A－F表示使用的相关工其，其中的E1和E2表示有关的酶。试问：E2应是________（酶）；经过E2的切割，供体染色体中的DNA片段中游离的磷酸基团总数的变化是：________。
在策略上，图1中的“多克隆位点”包含了多种、多个识别序列，请说出设计这种“多克隆位点”的目的：________。
3．LacZ基因可以使细菌在含有X－gttl（5－溴－4－氯－3－吲哚－B－D－半乳糖）底物和IPTG（一种乳糖类似物）的培养基上形成蓝色的菌落，即X－gal被lacZ基因编码产生的鼻半乳糖昔酶水解成蓝色；若要形成重组质粒，则在含X－gal的培养基上将形成白色菌落（而不是蓝色的）。
请据图2分析下列问题：
①用本无PUC118的大肠杆菌作为受体细胞，将培养瓶C中被连接处理后的DNA混合物倾入含X－gal、IPTG和________的D培养基平板上，其目的是________。
菌落生长结果图2中所示。
②过程V进行转移培养，则该应该挑选X、Y、Z中的________菌落进行液体培养。形成该颜色的生理原因是________。如此目的基因便被克隆了！
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