Question

【题目】某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下。将各种物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL，再经高温灭菌，制成固体培养基备用。

（1）根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌?_______（填“能”或“不能”），原因是___________________________。

（2）培养基用_________方法灭菌，培养皿用____________方法灭菌，待培养基冷却到________℃（填“20”、“30”、“40”或“50”）左右时，在________附近倒平板，等平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，可以防止__________，以免造成污染。

（3）要统计每克土壤样品中活菌数目，宜采用__________法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的___________就能大约推测出样品中活菌数。

（4）培养分解尿素的细菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_______________。

（5）实验中使用过的培养基及其培养物必须经过_________处理后才能丢弃，以防止微生物的扩散。

Answer 1

【答案】

（1）不能 培养基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，不能选择出只以尿素为氮源的微生物（培养基含蛋白胨，蛋白胨中含有氮元素）（2分）

（2）高压蒸汽灭菌 干热灭菌 50 酒精灯火焰 培养皿盖上的水珠落入培养基（2分）

（3）（稀释）涂布平板（2分） 菌落数目

（4）将未接种的培养基在适宜温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生（2分）

（5）灭菌

【解析】

试题分析：

（1）分离土塘中分解尿素的细菌尿素应为唯一氮源，配方中蛋白胨也是氮源。

（2）培养基一般用高压蒸汽灭菌；培养皿耐高温可以采用干热灭菌；培养基温度过低会凝固，所以在50℃左右开始倒平板；倒平板时要无菌操作，一般在酒精灯火焰处操作；培养基倒置能防止培养皿盖上的水珠落入培养基。

（3）“活”菌数目，说明应采用稀释涂布平板计数法；一般认为每个细菌能增殖为一个菌落，根据菌落数目即可统计活菌数目。

（4）检测培养基是否被污染的方法一般是：将未接种的培养基在适宜温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生。

（5）为防止微生物的扩散，应灭菌后才能丢弃。