Question

1．科学家从链霉素提取抗除草剂基因（bar基因），培育抗除草剂作物，回答下列问题：

（1）如图是重组质粒示意图，据图分析，需用BamHⅠ和BgIⅡ酶处理链霉菌的DNA，以提取目的基因．为了筛选出成功导入dar基因的受体细胞，需在受体细胞培养基中添加潮霉素．
（2）将种子的胚划伤，简称划胚，请说出农杆菌把将bar基因导入划胚细胞的过程．
（3）某兴趣小组要探究各种划胚方式（包括横划、纵划和穿刺），对bar基因导入大豆种子胚细胞效率的影响，请将有关实验步骤补充完整．
步骤1：将数量相等的各种划胚方式的种子，浸泡在带bar基因的农杆菌菌液中培养2-3天；
步骤2：用DNA分子杂交技术鉴定萌发植株的细胞是否导入bar基因．
（4）下表是不同植物对除草剂耐受性研究的实验结果．据表分析可知，玉米对除草剂耐受性最大，判定依据是随着除草剂浓度的增加，玉米成活苗数下降幅度最小，且高于大豆和高粱．
不同浓度的除草剂处理后植物苗存活率

植物	除草剂浓度
	0%	0.025%	0.05%	0.1%	0.2%
玉米	100%	100%	94.1%	88.2%	58.8%
大豆	94.1%	88.2%	82.4%	82.4%	0%
高粱	94.1%	88.2%	82.4%	52.9%	0%

Answer 1

分析 1、基因工程的基本工具：分子手术刀”--限制性核酸内切酶（限制酶）、“分子缝合针”--DNA连接酶、“分子运输车”--载体．
2、基因工程的基本操作程序有四步：①目的基因的获取，②基因表达载体的构建，③将目的基因导入受体细胞，④目的基因的检测与鉴定．

解答 解：（1）据图分析，提取抗除草剂基因（bar基因），需用BamHⅠ和BgIⅡ酶处理链霉菌的DNA．潮霉素抗性基因用于筛选和鉴别含有目的基因的受体细胞，因此要筛选出成功导入dar基因的受体细胞，需在受体细胞培养基中添加潮霉素．
（2）借助农杆菌把将bar基因导入划胚细胞的过程为：伤口处的胚细胞分泌酚类化合物，吸引农杆菌移向这些细胞，使bar基因随Ti质粒上的T-DNA转移至受体细胞．
（3）探究各种划胚方式对bar基因导入大豆种子胚细胞效率的影响，实验步骤为：
步骤1：将数量相等的各种划胚方式的种子（包括横划、纵划和穿刺），浸泡在带bar基因的农杆菌菌液中培养2-3天；
步骤2：用DNA分子杂交技术鉴定萌发植株的细胞是否导入bar基因．
（4）据表分析可知，随着除草剂浓度的增加，玉米成活苗数下降幅度最小，且高于大豆和高粱，因此玉米对除草剂耐受性最大．
故答案为：
（1）BamHⅠ和BgIⅡ潮霉素
（2）伤口处的胚细胞分泌酚类化合物，吸引农杆菌移向这些细胞，使bar基因随Ti质粒上的T-DNA转移至受体细胞
（3）将数量相等的各种划胚方式的种子，浸泡在带bar基因的农杆菌菌液    DNA分子杂交
（4）随着除草剂浓度的增加，玉米成活苗数下降幅度最小，且高于大豆和高粱（或“与大豆和高梁相比，在不同除草剂浓度下，玉米苗的存活率最高”）

点评 本题考查了基因工程的有关知识，要求考生能够掌握基因工程的操作步骤，识记基因工程的操作工具及作用，能够结合图示以及所学知识准确答题，难度适中．