Question

根据所提供材料，回答问题．
“烟草有害健康”，人人皆知．那么，能否通过实验，进一步了解烟草对微生物基因突变的影响？已知：粘质沙雷氏菌在正常情况下生长，是红色菌落；当外界因素引发粘质沙雷氏菌发生突变时，菌落将呈现白色．某校学生小组设想：若用不同浓度的烟草浸出液处理粘质沙雷氏菌，会发生什么？
供选材料及器具：粘质沙雷氏菌液，烟草浸出液母液；NaCl，蛋白胨，琼脂，4mol/L NaOH 溶液；培养皿，锥形瓶，量筒，1毫升移液管，烧杯，酒精灯，接种环，pH试纸等．
请补充、完善以下方案：
提出假设：
（1）假设

 

．
实验设计：
步骤一：制备培养基
（2）完成步骤一必须选用的材料是

 

．（至少写出2种）
步骤二：制备烟草浸出液的稀释液
（3）烟草浸出液的稀释液制备方法与要求

 

 

．
步骤三：接种、培养
（4）用不同浓度的烟草浸出液培养粘质沙雷氏菌；用接种环蘸取菌液以

 

法接种在培养基上．接种时，需要将灼烧后的接种环冷却后再取菌种，原因是

 

．
（5）在整个实验过程中，为保证无杂菌污染，除培养基灭菌外，还需要将

 

、

 

等灭菌．
步骤四：观察并记录数据：
分析讨论
（6）将可能的实验结果在下面的方框中用直角坐标图直观地表示出来（实验数据用相对值表示即可，标明纵横坐标含义）：

Answer 1

考点：微生物的分离和培养

专题：

分析：阅读题干可知本题是以探究实验为依托的微生物的实验室培养技术，梳理相关的知识点，然后根据问题的具体要求分析综合做出解答．

解答： 解：（1）根据实验目的做出假设是烟草浸出液浓度越大，菌落的红色越少（白色菌落越多）．
（2）制备培养基必须选用的材料有 蛋白胨、琼脂、NaCl等
（3）烟草浸出液的稀释液制备方法用移液管移取烟草浸出液母液1ml放入试管中，再加进行9ml蒸馏水进行稀释；稀释液制备的要求是浸出液的稀释液应有一定浓度梯度，梯度一致，有一定数量，至少3～5个浓度．
（4）用不同浓度的烟草浸出液培养粘质沙雷氏菌；用接种环蘸取菌液以划线（或点接）法接种在培养基上．接种时，需要将灼烧后的接种环冷却后再取菌种，防止温度过高杀死菌种，从而保证接种为活菌种．
（5）在整个实验过程中，为保证无杂菌污染，除培养基灭菌外，还需要将接种工具，接种环境、接种过程、稀释液等进行灭菌．
故答案应为：
（1）烟草浸出液浓度越大，菌落的红色越少/白色菌落数越多
（2）蛋白胨；  琼脂    （或NaCl、等）
（3）用移液管移取烟草浸出液母液进行稀释；
浸出液的稀释液应有一定浓度梯度，梯度一致；
有一定数量，至少3～5个等
（4）划线（或点接）     冷却可保证接种为活菌种
（5）接种环境灭菌    接种过程灭菌    稀释液灭菌等
（写出其中两项即可）
（6）曲线图（2分）（趋势、横纵坐标标识正确）（曲线趋势应与假设对应）   

点评：本题的知识点是微生物培养的探究实验，主要考查学生设计和完善实验的能力和对实验数据的处理和分析能力．