Question

29、科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组，并成功地在大肠杆菌中得以表达。但在进行基因工程的操作过程中，需使用特定的限制性核酸内切酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制性核酸内切酶I的识别序列和切点是—G^↓GATCC— ，限制性核酸内切酶II的识别序列和切点是—^↓GATC—，据图回答：

（1）过程①所需要的酶是　　　　　。

（2）在构建基因表达载体过程中，应用限制性核酸内切酶     　切割质粒，用限制性核酸内切酶   　  切割目的基因。用限制酶切割目的基因和运载体后形成的黏性末端通过___________     原则进行连接。人的基因之所以能与大肠杆菌的DNA分子进行重组，原因是          　　　    。

（3）在过程③一般将受体大肠杆菌用_________处理，以增大　　　　　的通透性，使含有目的基因的重组质粒容易进入受体细胞。

（4）将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上得到如下图a的结果（黑点表示菌落），能够生长的细菌中已导入了             ，反之则没有导入；再将灭菌绒布按到培养基a上，使绒布表面沾上菌落，然后将绒布按到含四环素的培养基上培养，得到如图b的结果（空圈表示与a对照无菌落的位置）。与图b空圈相对应的图a中的菌落表现型是                 ，这些细菌中导入了________________。

（5）人体的生长激素基因能在细菌体内成功表达是因为                         。写出目的基因导入细菌中表达的过程                                     。

Answer 1

解析：考查基因工程的基本操作程序的相关知识，用限制性内切酶切割DNA可以产生粘性末端，用大肠杆菌作为受体细胞时，要用Ca²⁺处理，以利于表达载体进入，检测基因的表达。

答案：

29、（1）逆转录酶　　（2）I　　II  　碱基互补配对　　人的基因与大肠杆菌DNA双螺旋结构相同　　（3）CaCl₂　  细胞壁　　（4）普通质粒或重组质粒  　抗氨苄青霉素和四环素抗性　　重组质粒　　（5）共用一套密码子   生长激素基因——>mRNA——>生长激素