【题目】回答下列（一）、（二）小题：
（一）为了提高果胶酶的利用率，科学家进行了固定化果胶酶的相关研究。
（1）果胶酶的固定化：取磁性壳聚糖微球固体颗粒，加入果胶酶溶液，30℃条件下震荡1h，装入下图所示的反应柱中，用蒸馏水洗去____________，放置在 4℃ 冰箱中 保存。上述固定化果胶酶的方法属于__________________。
A．包埋法 B．吸附法 C．共价偶联法 D．交联法
（2）果胶酶活力测定方法：以 1g 果胶酶单位时间内催化产生的主要产物_____________的量计算酶的活力。已知 3，5-二硝基水杨酸与果胶水解的主要产物共热能产生棕红色 的氨基化合物，在一定范围内产物的量和反应液颜色深浅成正比，可用_____________法测定产物的量。此方法需要制作标准曲线，如上图所示，其中纵坐标一般为_______________ 。
（3）下图是固定化果胶酶的部分研究结果，据图可知用上述方法制备的固定化果胶酶与游 离酶相比最适温度_______________（升高/降低）。
（4）在果汁生产中使用固定化果胶酶具有很多优点，以 下说法中不属于其优点的是____________
A．固定化果胶酶可以重复回收，多次利用
B．固定化果胶酶可以提高酶的稳定性和果汁的质量
C．便于果汁加工工艺操作的连续化、自动化
D．用于处理溃碎果实，可以提高出汁率，促进澄清
（二）某研究小组欲利用抗虫基因，通过农杆菌转化法培育抗虫玫瑰。图 1 和图 2 分别表示出了抗虫基因和农杆菌 Ti 质粒的限制性核酸内切酶的识别位点和抗生素抗性基因（PstⅠ、 SmaⅠ、AluⅠ表示限制性核酸内切酶切割位点；amp 为氨苄青霉素抗性基因，tet 为四环素 抗性基因）
请回答：
（1）该抗虫基因取自某种生物的 cDNA 文库。若想短时间内得到大量的抗虫基因，需用到 ___________技术。
（2）形成重组质粒时，为保证目的基因以唯一方向接入，可选用_____________ （填限制酶 的种类）分别切割目的基因和 Ti 质粒，再用 _________连接，形成重组 DNA 分子， 再与经过_____处理的本身无 amp 和 tet 的农杆菌液混合，使重组 DNA 进入农杆 菌。导入了重组质粒的农杆菌能够在含有______________的培养基中生长。再利用 农杆菌转入培养的玫瑰细胞，使目的基因导入玫瑰细胞中。
（3）将含有导入了目的基因的玫瑰细胞的试管放在___________上，进行液体悬浮培养获得胚 性细胞，进而培育成抗虫玫瑰。这一技术利用的原理是 ____________。
【答案】未固定的游离果胶酶 B 半乳糖醛酸 光电比色法 光密度值（OD 值） 升高 (D PCR SmaI 和 PstI DNA 连接酶 CaCl2 氨苄青霉素 摇床 植物细胞具有全能性
【解析】
（一）本题考查了酶的固定化以及酶活力测定的有关知识，要求学生掌握固定化酶的方法以及优点，识记果胶酶的作用机理，掌握酶活力测定的方法等。
（二）本题考查基因工程等生物技术及其应用等知识，要求考生能利用所学知识解读图形，选择合适的限制酶获取目的基因并切割质粒形成重组DNA分子；掌握基因工程的操作程序及其应用，了解植物细胞工程技术及生态工程。
(一) （1）磁性壳聚糖微球表面的氨基可以与蛋白质分子的羧基反应，从而将蛋白质分子吸附固定，因此该方法固定化果胶酶利用的是吸附法。实验装置中，30℃条件下震荡1h，装入图所示的反应柱中，需要用蒸馏水洗去未固定的游离果胶酶，然后放置在4℃冰箱中保存。
（2）果胶酶水解果胶主要生成β-半乳糖醛酸，以1g果胶酶单位时间内催化产生的半乳糖醛酸的量计算酶的活力。此方法需要制作标准曲线，该标准曲线的横坐标应该是半乳糖醛酸的含量，纵坐标一般为光密度值（OD值）。
（3）分析曲线可知，游离酶的最适温度在40℃左右，而固定化酶的最适温度在50℃左右，即用上述方法制备的固定化果胶酶与游离酶相比最适温度升高。
（4）在果汁生产中使用固定化果胶酶具有很多优点，如：固定化果胶酶可以重复回收，多次利用；固定化果胶酶可以提高酶的稳定性和果汁的质量；便于果汁加工工艺操作的连续化、自动化；用于处理溃碎果实，属于不道德行为，不是使用固定化果胶酶的优点。
（二）（1）若想短时间内得到大量的抗虫基因，需用到PCR技术。
（2）分析图一可知，获取目的基因可用限制酶SmaI和PstI或只使用PstI，切割质粒时必需保证标记基因不能全部被破坏，因此为获得大量抗虫基因，且保证形成重组质粒时，目的基因以唯一方向接入，可选用Sma I和PstI分别切割目的基因和Ti质粒，再用 DNA连接酶连接，形成重组DNA分子，此时的重组DNA分子中的标记基因为amp；再与经过CaCl2处理（使其成为感受态细胞）的无amp和tet的农杆菌液混合，使重组DNA进入农杆菌。再利用农杆菌转入培养的玫瑰细胞，使目的基因导入玫瑰细胞中。
（3）将含有导入了目的基因的玫瑰细胞的试管放在摇床上震荡，进行液体悬浮培养获得胚性细胞，进而培育成抗虫玫瑰，原理是植物细胞具有全能性。
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【题目】如图表示减数分裂不同时期人体细胞内染色体、染色单体和核DNA含量的关系。男性红绿色盲患者体内中一个处于时期II的细胞和女性红绿色盲基因携带者中一个处于时期I的细胞进行比较，不考虑变异的情况下，下列比值不可能出现的是
A. 常染色体数目之比为1:1 B. 常染色体数目之比为2:1
C. 红绿色盲基因数目之比为1:1 D. 红绿色盲基因数目之比为2:1
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【题目】为了研究光照对玉米叶片净光合速率的影响，测得玉米叶片在不同光照强度下CO2吸收量的变化曲线如图所示。回答下列问题：
（1）在t1～t2时，暗反应速率逐渐_____（填“增大”“减小”或“不变”），原因是_____。
（2）在t3时，玉米叶肉细胞的叶绿体利用CO2的相对值为_____。
（3）在t3～t4时，给予全日照，玉米叶片吸收CO2量的相对值不再上升，说明_____。此时玉米叶肉细胞间CO2浓度远低于空气中CO2浓度，原因是_____。
（4）光合作用旺盛时，很多植物合成的糖类通常会以淀粉的形式临时储存在叶绿体中，假如以大量可溶性糖的形式存在，则可能导致叶绿体_____。
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【题目】适宜的光照、温度条件下，在0.003%CO2和1%CO2两种不同环境中某植物叶肉细胞卡尔文循环中三碳酸和RuBP微摩尔浓度的变化趋势如图所示。据图分析下列叙述合理的是（ ）
A. ab段碳反应速率越来越小
B. bc段甲物质浓度降低是因为生成速率变小
C. cd段光合作用较弱是因为光反应产物不足
D. ae段叶肉细胞的光饱和点稳定不变
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【题目】四倍体马铃薯（4n=48）易感青枯病菌（感染后叶片萎蔫），野生二倍体S．Chacoense（2n=24）具有天然青枯病抗性基因，科研人员利用下图所示方法获得抗青枯病的马铃薯植株，相关说法不正确的是（ ）
A.①②需用到纤维素酶和果胶酶处理
B.③通常采用PEG诱导原生质体融合
C.④过程体现了植物细胞的全能性
D.可通过接种青枯病菌检测杂种植株的抗病效果
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【题目】1913 年，丹麦植物学家波森·詹森为证明促进生长的物质由苗尖端向下传递，进行了实验。其中一组实验的设计如图所示，另一组是（ ）
A. 
B. 
C. 
D. 
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【题目】为研究植物不同器官在不同发育时期的有机物积累情况，科研人员分别在不同光照条件下给不同发育时期的某种植物供应14CO2，一定时间后测定植株营养器官和生殖器官中所含14C量占植株14C总量的比例，结果如图所示，以下叙述正确的是（ ）
A.该实验研究了两种自变量对光合产物积累情况的影响
B.生殖器官发育早期，光合产物大部分被分配到营养器官
C.遮光70%条件下，分配到生殖器官和营养器官中的光合产物量始终接近
D.实验结果说明生殖器官与营养器官的生长是完全对抗的
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【题目】拟南芥超矮生型突变体有激素合成缺陷型和激素不敏感型两种。研究者以野生型和某种超矮生型突变体拟南芥为材料，分别用不同浓度赤霉素和生长素处理，实验结果如下。下列叙述正确的是
A. 图甲表明，促进野生型拟南芥生长的最适赤霉素浓度是1.5μM
B. 图乙表明，高浓度的生长素对野生型拟南芥的生长具有抑制作用
C. 实验表明，该种超矮生型突变体对赤霉素和生长素不敏感
D. 实验表明，超矮生型突变体细胞表面一定缺乏赤霉素和生长素的受体
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【题目】我国有2亿亩供水和温度条件适宜种植水稻的不同类型的盐碱地，培育耐盐水稻新品种对扩大水稻种植面积和提高产量非常重要。
（1）脯氨酸是植物细胞内凝固点低、水溶性最大的氨基酸，是研究植物逆境胁迫的重要指示物。下列关于脯氨酸性质和功能的说法正确的是_________（填字母）。
A．脯氨酸可能是合成植物蛋白的原料之一
B．细胞内脯氨酸含量升高，可以提高渗透压应对盐碱胁迫
C．细胞内脯氨酸含量升高，有利于应对低温胁迫
（2）水稻是一种对盐碱中度敏感的作物。研究人员选择A、B、C三个新品种水稻同时栽培于含0．15mol/L的NaCl且pH不同的溶液中，以分别培养在蒸馏水（pH 6．5）中的三个品种水稻作为对照，检测水稻幼苗地下部分脯氨酸含量的变化。
不同pH下水稻幼苗地下部分脯氨酸含量
①该实验的自变量除了0．15 mol/L的NaCl以外，还有_______________________。
②由此可以初步筛选出适合在不同类型的盐碱地中生长的水稻品种是___________，做出判断的依据是_________________________________________。
（3）对于脯氨酸提高植物细胞渗透压从而应对盐碱胁迫的机理，有的学者提出新的推测：脯氨酸通过提高液泡内Na+浓度增强植物吸水能力。研究者对这一推测进行了实验探究，其中实验组的材料选择、处理及检测指标分别是_________、________、________（填字母）。
a．脯氨酸转换基因敲除突变体 b．液泡Na+通道基因敲除突变体
c．野生型植株 d．正常供水环境
e．模拟盐碱胁迫环境 f．测定液泡内Na+浓度
g．植株吸水能力
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